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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97238 |
商品属性:
名称 大鼠肾动脉平滑肌细胞 2.组织来源:肾动脉组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠肾动脉平滑肌细胞分离自肾动脉组织;肾动脉的分支为叶间动脉,穿行于肾柱内,上行至皮质与髓质交界处,形成与肾表面平行的弓状动脉。小叶间动脉向被膜发出毛细血管,并向周围的肾小体发出入球小动脉,进入肾小囊后形成球形的毛细血管网,再汇集成出球小动脉,出肾小体。直小动脉分支形成毛细血管网,再汇合成直小静脉,入弓状静脉、叶间静脉,最后汇合成肾静脉经肾门出肾,注入下腔静脉。肾动脉既是肾的营养血管,又是肾的机能血管,与肾泌尿机能密切相关。肾动脉在肾实质内形成两个毛细血管网:肾小球毛细血管网,血压较高,利于血浆滤过形成原尿;球后毛细血管网,血压较低,利于肾小管的重吸收。动脉平滑肌细胞是肾动脉的重要结构细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肾动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。 5.方法简介: ()实验室分离的大鼠肾动脉平滑肌细胞采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的大鼠肾动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R061 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
兔P物质受体(SP-R)免疫试剂盒进口、组装
兔子硫酸角质素(KS)免疫试剂盒现货供应
人胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7/MAC25/PSF)免疫试剂盒现货供应
人潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)免疫试剂盒进口、组装
人雌激素受体β(ESR2)免疫试剂盒现货供应
人3-羟基-3-甲基戊二酰辅A合1(HMGCS1)免疫试剂盒进口、组装
猫游离三碘甲状腺原(Free-T3)免疫试剂盒现货供应
大鼠血管生成抑制因子免疫试剂盒进口、组装
植物乙酸(IAA)免疫试剂盒*直销
大豆酪蛋白消化物吐ows\system32\EhStorShell.dll
大鼠肾动脉平滑肌细胞Ornithobacterium rhinotracheale 鼻气管炎鸟杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周TReP132/RAPA 抗雌激素抵抗蛋白2抗体 规格: 0.2ml
Sepik Virus塞皮克病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Ku-80 DNA修复Ku-80抗体 规格: 0.1ml
Pathogenic Escherichia coli致病性大肠杆(致病性大肠埃希氏)同致泻性大肠杆,编号39500 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PHAPI2/APRIL 酸性核磷蛋白32家族B抗体 规格: 0.2ml
Uropathogenic Escherichia coli(UPEC)泌尿道致病性大肠杆(大肠埃希氏)LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 磷酸化丝裂原活化蛋白激1/2抗体 规格: 0.1ml
Clostridium sporogenes生孢梭(生孢梭状芽孢杆)染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-3天SV2A 突触泡蛋白2A抗体 规格: 0.2ml
Folium perillae紫苏叶PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周TEF3/TEAD4 转录增强因子TEF3抗体 规格: 0.2ml
Lactococcus spp. 乳酸杆属通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-2周phospho-MYF5 (phospho Ser49) 磷酸化生肌决定因子Myf5抗体 规格: 0.1ml
Bacillus cereus蜡样芽胞杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Connexin-45 间隙连接蛋白45抗体 规格: 0.1ml
Semen allii tuberosi韭菜子探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周FGF12 成纤维细胞生因子12抗体 规格: 0.2ml
Brucella bovis牛布鲁氏杆LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-c-Raf(Ser301) 磷酸化原基因c-Raf抗体 规格: 0.1ml
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。