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培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
商品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 | BJ-X96741 |
商品介绍:
名称 RIN-m5F (大鼠胰岛β细胞瘤细胞) 别称RIN m5F; Rin-M-5F; Rin-m-5F; RINm-5F; RINm5F; RIN Cl-5F 组织来源胰腺/朗格汉斯胰岛 生长特性贴壁细胞 细胞形态上皮细胞样 背景描述RIN-m5F细胞是大鼠胰岛细胞RIN-m的克隆,分泌胰岛素及L型多巴脱羧酶;RIN-m5F细胞不产生生长激素抑制激素。 生物安全等级1 生长培养基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例1:3-1:4 推荐换液频率2~3次/周 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ 基因表达情况insulin; L-dopa-decarboxylase |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL1R1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人细胞裂解液 (阳
RIN-m5F (大鼠胰岛β细胞瘤细胞)20次 Southern Marker Oligo(DIG) 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Serum amyloid P-component
500mL Blotto-Tween in TBS with azide Blotto-Tween in TBS with azide 常温保存 15.6-1000 pg/mL 血栓素B2(Thromboxane B2)ELISA试剂盒
1瓶 QGY-7703株 QGY-7703 低温运输和保存蛋白胨E进口、国产Gelatin Peptone250克BR
250g D- D-Mannitol 室温干燥保存 78-5000 pg/mL 人D结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒
2 ug pIRES-puro pIRES-puro 低温运输,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human D-aspartate oxidase
50次 柱式RNA纯化试剂盒 Column RNAclean-Up 常温保存,RNA洗脱液需要-20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human 5-hydroxytryptamine receptor 1B
1mL 植物蛋白抑制剂 Protease Inhibitor for Plant -20℃保存 3.9-250 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein(a)
紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基(颗粒) 250g 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein-arginine deiminase type-2
25g N-2- -N’-2- 乙基磺酸钠 HEPES,Sodium Salt 室温保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP5
150 U 限制性内切NotI Restriction Endonuclease -20℃保存察氏培养基进口、国产Czapek Dox Agar250克用于酵母菌的培养
2 ug pTALETF_v2 (NI) pTALETF_v2 (NI) 低温运输,-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒