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操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97378 |
商品属性：
名称 大鼠视网膜Muller细胞 2.组织来源：视网膜组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 大鼠视网膜Muller细胞分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力*。视网膜Muller细胞作为视网膜中的主要胶质细胞，大约占视网膜胶质细胞的90%，因而在视网膜疾病中起着何种作用也受到越来越多的关注。在超微结构水平上，Muller细胞的胞质似乎比临近的其他细胞更高的电子密度，更发达的内质网，细胞核是典型的卵圆形或多角形。但在不同物种中或同一物种中的不同部位，Muller细胞形态也会有所差异的。视网膜Muller细胞是一种特化的神经胶质细胞，不仅具有维持视网膜的正常结构和功能的作用，并调制视网膜神经元活动，还能参与多种病理过程，尤其是眼底增殖性病变，如增生性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病视网膜病变等，体外培养Muller细胞是研究这些增殖性病变途径之一。 5.方法简介： ()实验室分离的大鼠视网膜Muller细胞采用胶原酶消化法和反复消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： ()实验室分离的大鼠视网膜Muller细胞经GFAP免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R117 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传2-3代 消化液0.25% 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人抗SS-B/La抗体免疫试剂盒现货供应
石斑鱼卵黄蛋白原(VTG)免疫试剂盒进口、组装
胰蛋白胨大豆肉汤 英文名称： 产品规格：250g
沙氏葡萄糖液体培养基（SDB) 英文名称： 产品规格：500ml*20瓶
R3增殖培养基 英文名称： 产品规格：250g
小鼠抗胰蛋白(AT)免疫试剂盒进口、组装
小鼠B细胞活化因子(BAFF)免疫试剂盒现货供应
人组蛋白去乙酰化(HDAC)免疫试剂盒进口、组装
人羧化不全骨钙素(ucOC)免疫试剂盒现货供应
人富组糖蛋白(HRG)免疫试剂盒进口、组装
大鼠视网膜Muller细胞Herpes Simplex Virus(HSV)单纯疱疹病毒2型LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-ATG4A(Ser100) 磷酸化自噬相关蛋白4A抗体 规格: 0.1ml
Penaeus Monodon-type Baculovirus(MBV)斑节对虾杆状病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlRabbit Anti-Bovine IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml
Caulis perillae紫苏梗LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Profilin 1 前纤维蛋白1抗体 规格: 0.1mlGMRP1/BTBD10 糖代谢相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml
狼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Angiotensin II 管紧张素Ⅱ抗体 规格: 0.2mlSCN8A/Nav1.6 钠通道蛋白8α抗体 规格: 0.1ml
Canine Norovirus 犬诺瓦克病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受体3抗体 规格: 0.1mlphospho-EGFR (Tyr869) 磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1ml
Phialophora malorum苹果边腐病PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周NTAL B淋巴细胞链接激活蛋白抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-human IgG/APC APC标记的驴抗人IgG 规格: 0.1ml
Rhizoma polygonati黄精PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Phospho-Stat4 (Tyr693) 磷酸化信号转导和转录激活因子4抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-mouse IgM/Gold 胶体金标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.5ml
Plasmodium malariae三日疟原虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周FAIM2 FAS凋亡抑制分子2 规格: 0.2mlUCP-2 线粒体脱偶连蛋白2抗体 规格: 0.1ml
Ostertagia trifurcata三叉奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-Histone H3 (Thr11) 磷酸化组蛋白H3抗体 规格: 0.1mlUBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme 泛素激活E1抗体 规格: 0.2ml
Herba moslae香薷染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周DHPS1 短链脱还原1抗体 规格: 0.2mlLRRC62 富含亮重复蛋白62抗体 规格: 0.2ml
