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操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97242 |
商品属性：
名称 小鼠肾小球内皮细胞 2.组织来源：肾组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 小鼠肾小球内皮细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形，单层贴壁生长；细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧，与血流直接接触，是肾小球滤过膜的第一道屏障，可粘附细菌和白细胞，修复基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。 5.方法简介： ()实验室分离的小鼠肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： ()实验室分离的小鼠肾小球内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M063 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态内皮细胞样 传代特性可传2-3代 消化液0.25% 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
山羊前列腺素E2(PGE2)免疫试剂盒进口、分装
Corticosteroid()免疫试剂盒进口、分装
沙氏葡萄糖琼脂培养基（含氯） 英文名称： 产品规格：250g
RS培养基(RS琼脂平板) 英文名称：RS Medium 产品规格：100g
小鼠总(TB)免疫试剂盒*直销
小鼠结蛋白(Des)免疫试剂盒*直销
豚鼠基质金属蛋白9(MMP-9)免疫试剂盒进口、组装
人总蛋白C(TPC)免疫试剂盒*直销
人突触回蛋白2(SYNJ2)免疫试剂盒*直销
人化肌球蛋白轻链(PMLC)免疫试剂盒*直销
小鼠肾小球内皮细胞鸽子源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-human sIgA/FITC FITC标记的兔抗人分泌型IgA 规格: 100ugCK1+5+10+14 高分子量角蛋白抗体 规格: 0.2ml
Semen nelumbinis莲子PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周TRIM32 TRIM32抗体 规格: 0.1mlFBXO28 FBXO28蛋白抗体 规格: 0.2ml
Rhizopus cohnii科恩酒曲LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-P53(Ser392) 磷酸化瘤抑制基因P53抗体 规格: 0.1mlPSMD8 蛋白调解因子8抗体 规格: 0.2ml
Capillaria spp.毛细线虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-2周GADD45B 生抑制DNA损伤基因GADD45β抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-Monkey IgM/FITC FITC标记的兔抗猴IgM 规格: 0.3ml
Semen trichosanthis瓜蒌子LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周HSPB2 热休克蛋白B2抗体 0.1ml
Streptobacillus moniliformis念珠状链杆LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周DLC1/DLC8 胞浆动力蛋白轻链1抗体 规格: 0.2ml
Fasciola spp.肝片吸虫病通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周AD7C-NTP(human) 神经丝蛋白抗体（人） 0.2ml
Pasteurella trehalosi海藻巴斯德染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗人IgM 规格: 0.1ml
Campylobacter pybridis幽门弯曲杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用） 50次 低温 负20度 一年 2-3周Donkey Anti-rabbit IgG/PE PE标记的驴抗兔IgG 规格: 0.1ml
Avian Paramyxovirus 4(APMV)禽副粘病毒4型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周SP-D/PSPD 肺表面活性蛋白D抗体 规格: 0.1ml
