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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97380 |
商品属性：
名称 小鼠虹膜色素上皮细胞 2.组织来源：眼球 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 小鼠虹膜色素上皮细胞分离自眼球虹膜组织；虹膜是眼睛构造的一部分，属于眼球中层，位于血管膜的最前部；在睫状体前方虹膜，中心有一圆形开口，称为瞳孔，犹如相机当中可调整大小的光圈，内含色素决定眼睛的颜色。日间光线较为强烈时，虹膜会收蹜，只使一小束光线穿透瞳孔，进入眼睛；当进入黑暗环境中，虹膜就会往后退缩，使瞳孔变大，让更多的光线进入眼睛，多数的脊椎动物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮细胞（IPE）是虹膜重要结构组成细胞之一，位于虹膜组织的后面，和视网膜色素上皮细胞（RPE）同样起源于神经外胚叶层，可能具有相似的生物学功能，因此对IPE的研究将为防治因RPE结构或功能异常而导致的眼底病提供新思路。 5.方法简介： ()实验室分离的小鼠虹膜色素上皮细胞采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： ()实验室分离的小鼠虹膜色素上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M118 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25% 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人抗BP180抗体(anti-BP180-Ab)免疫试剂盒现货供应
兔骨钙素/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫试剂盒进口、分装
人激肽(BK)免疫试剂盒*直销
人抗人绒毛膜抗体(AhCGAb)免疫试剂盒进口、分装
人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)免疫试剂盒进口、分装
人γ分泌素激活蛋白(PION)免疫试剂盒进口、分装
犬血管紧张素1-7(Ang1-7)免疫试剂盒现货供应
大鼠转化生长因子α(TGF-α)免疫试剂盒*直销
大鼠内脏脂肪特异性丝蛋白抑制剂(vaspin)免疫试剂盒*直销
大鼠表皮生长因子受体(EGF
小鼠虹膜色素上皮细胞Elaeophora schneideri施氏油脂线虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周YY1AP1/HCCA2 肝相关蛋白2抗体（转录因子YY1结合蛋白1抗体） 规格: 0.2mlGoat Anti-Chicken IgG/Bio 标记的羊抗鸡IgG 规格: 0.1ml
Human Rhinovirus 16 人鼻病毒16 探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗人IgG 规格: 0.1ml
Semen pharbitidis牵牛子探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周CD105/Endoglin CD105抗体 规格: 0.1ml
Trypanosoma brucei gambiense布氏冈比亚锥虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周FAM82B 微管相关蛋白FAM82B抗体 规格: 0.2ml
Mouse Hepatitis Virus(MHV)小鼠肝炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周H1N1 Matrix Protein 2/Influenza A bp1 A型猪毒H1N1-M2蛋白抗体 规格: 0.2ml
Contagious Bovine Pleuropneumonia (CBPP)牛传染性胸膜肺炎探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用） 50次 低温 负20度 一年 1-2周phospho-PKMYT1(Thr495) 磷酸化髓鞘转录因子1激抗体 规格: 0.1ml
蟹源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CTCF 转录阻抑蛋白CTCF抗体 规格: 0.2ml
Arcanobacterium haemolyticum溶血隐秘杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周ADCY6 苷酸环化6抗体 0.2ml
Potato Virus A(PVA)马铃薯病毒A型PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗鸡IgG 规格: 0.1ml
Flos campsis凌霄花PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周NR2E1/Tailless 核受体蛋白NR2E1抗体 规格: 0.2ml
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
