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培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
商品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 | BJ-X97495 |
商品介绍:
名称 大鼠骨内膜间充质干细胞 2.组织来源:股骨、胫骨 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠骨内膜间充质干细胞分离自股骨、胫骨;骨内膜是一层致密结缔组织膜,覆盖在骨的表面(关节面除外),新鲜骨内膜呈粉红色,含有丰富的血管、神经和成骨细胞。此外,附着于骨的肌腱、韧带于附着部位都与骨内膜编织在一起。因而骨内膜与骨质结合甚为牢固。骨内膜富含血管、神经,通过骨质的滋养孔分布于骨质和骨髓。骨内膜分内、外两层,外层主要是粗大的胶原纤维束,部分纤维穿入骨质,使骨内膜固定于骨面;内层疏松,含成骨细胞和破骨细胞(分别具有产生新骨质和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松质的网眼也衬着一层菲薄的结缔组织膜,叫做骨膜。骨内膜的内层和骨膜有分化成骨细胞和破骨细胞的能力,以形成新骨质和破坏、改造已生成的骨质,所以对骨的发生、生长、修复等具有重要意义。骨内膜间充质干细胞是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中的种子细胞。骨内膜间充质干细胞的体外培养条件要求较高,在培养过程中,受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。 5.方法简介: ()实验室分离的大鼠骨内膜间充质干细胞采用冲洗骨髓、消化骨内膜、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的大鼠骨内膜间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R161 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
犬胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)免疫试剂盒进口、分装
兔肾素(Renin)免疫试剂盒*直销
人血小板型果糖激(PFKP)免疫试剂盒进口、分装
人乳酸脱氢A(LDHA)免疫试剂盒进口、分装
人抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)免疫试剂盒*直销
人谷脱羧(GAD)免疫试剂盒*直销
人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)免疫试剂盒*直销
人1,25二羟基D3(1,25 DHVD3)免疫试剂盒*直销
绵羊褪黑素(MT)免疫试剂盒现货供应
猴催乳素(PRL/LTH)免疫试剂盒进口、组装
大鼠骨内膜间充质干细胞六种致泻大肠杆六重探针法荧光定量PCR试剂盒(无) 定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Myosin-XVIIIb 肌球蛋白XVIIIb抗体 0.2ml
Yellow Fever Virus(YFV)黄热病病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Myotilin 肌收蛋白MYOT抗体 规格: 0.1ml
Pepino Mosaic Virus(PepMV)凤果花叶病毒PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Mouse Anti-rat IgG/Cy7 Cy7标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml
Semen arecae prepareta焦槟榔探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周SR1/Sorcin 抗药蛋白抗体 规格: 0.2ml
Brucella neotomae木鼠布鲁氏LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周KCNC1 离子通道蛋白Kv3.1抗体 规格: 0.1ml
Paramushir病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周GPR55 蛋白偶联受体55抗体 规格: 0.2ml
Radix scrophulariae玄参LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周MIRK/Dyrk1B 双特异性酪磷酸化调节激1B 规格: 0.2ml
杏仁源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周C6orf62 6号染色体开放阅读框62抗体 规格: 0.2ml
Pichinde virus(PARV)皮钦德病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PFKL/Fructose 6 Phosphate Kinase 6磷酸果糖激抗体 规格: 0.1ml
Maize Dwarf Mosaic Virus(MDMV)玉米矮小花叶病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化细丝蛋白A抗体 规格: 0.1ml