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细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97094 |
商品属性：
名称 小鼠甲状腺滤泡上皮细胞 2.组织来源：甲状腺组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 小鼠甲状腺滤泡上皮细胞分离自甲状腺组织；甲状腺是脊椎动物非常重要的腺体，属于内分泌器官。在哺乳动物身体中，它位于颈部甲状软骨下方，气管两旁。甲状腺表面有结缔组织被膜，表面结缔组织深入到腺实质，将实质分为许多不明显的小叶，小叶内有很多甲状腺滤泡和滤泡旁细胞。甲状腺控制使用能量的速度、制造蛋白质、调节机体对其他贺尔蒙的敏感性。甲状腺依靠制造甲状腺素来调整这些反应，有T3和T4。这两者调控代谢、生长速率还有调解其他的身体系统。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲状腺也生产降钙素，调节体内钙的平衡。其中，甲状腺滤泡上皮细胞（也称为滤泡细胞或主要细胞）是在甲状腺细胞是负责生产和分泌甲状腺激素，甲状腺素（T4）和三碘甲状腺原氨酸（T3）。 5.方法简介： ()实验室分离的小鼠甲状腺滤泡上皮细胞采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： ()实验室分离的小鼠甲状腺滤泡上皮细胞经TG（甲状腺球蛋白）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M022 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态上皮细胞样 传代特性可传1-2代 消化液0.25% 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人白介素35(IL-35)免疫试剂盒进口、分装
人2 型次黄核苷酸脱氢(IMPDH)(IMPDH2)免疫试剂盒进口、分装
牛α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒*直销
猴骨形态发生蛋白受体2型(BMPR2)免疫试剂盒进口、组装
大鼠弹力蛋白免疫试剂盒*直销
植物过氧化氢2(CAT2/CAT)免疫试剂盒进口、组装
接触皿培养基 英文名称：contacts medium 产品规格：250g
TSN琼脂 英文名称：TSN Agar 产品规格：250g
猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)免疫试剂盒进ows\system32\EhStorShell.dll
小鼠甲状腺滤泡上皮细胞Parvovirus B19(PVB19)细小病毒B19 探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-2周Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318) 磷酸化丝裂原活化蛋白激磷酸-1抗体 规格: 0.1ml
Cortex periplocae香加皮探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周MAPKAPK5/PRAK p38调节/激活蛋白激抗体 规格: 0.2ml
Turkey Hemorrhagic Enteritis Virus(TuHEV)火鸡出血性肠炎病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Neuropilin-2 神经纤毛蛋白-2抗体 规格: 0.1ml
Nematodirus spathiger匙状*毛样线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CHRNA7 碱型乙酰受体α7抗体 规格: 0.1ml
Akabane Disease Virus(AKAV)牛赤羽病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-PDGFRA(Tyr762) 磷酸化小板源性生因子受体α 规格: 0.1ml
黄鱼源性成分PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser) 兔抗粘附多肽抗体 规格: 0.2ml
Baculovirus Penaei(BP)对虾杆状病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-2周PNPO 磷酸吡哆醇氧化抗体 规格: 0.2mlSLAMF9 CD2F-10抗体 规格: 0.2ml
Pseudomonas syringae pv. syringae丁香假单胞杆丁香致病变种PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-MAP1LC3A(Ser12) 磷酸化自噬微管相关蛋白轻链3抗体 规格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Bio 标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1ml
Cortex mori桑白皮PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Retinoic acid induced 17 维甲酸诱导蛋白17抗体 规格: 0.2mlCYP46 24S－羟化 规格: 0.2ml
Helicobacter cinaedi同性恋螺杆LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周FLAG Tag(CT) FLAG Tag标签抗体（C端） 规格: 0.1mlphospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛细管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 规格: 0.1ml
