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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97686 |
商品属性:
名称 毛囊干细胞 2.组织来源:毛囊组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 人毛囊干细胞分离自皮肤毛囊组织;毛囊是表皮细胞连续形成的袋样上皮。其基底是真皮凹进的真皮毛乳头,中心是一根毛发,立毛肌的一侧斜附在毛囊壁上,附着点的上方为皮脂腺通入毛囊的短颈,毛囊在皮肤表面的开口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下组织中,毛囊向下伸入真皮约有一厘米深度,它是由包绕毛发与表皮相连的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所组成的一个结构比较复杂的器官附件组织。毛囊干细胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一种细胞。毛囊干细胞属于成体干细胞,在体内处于静止状态,在体外培养作用下表现出惊人的增殖能力。研究发现,毛囊干细胞具有多向分化潜能,它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺,参与皮肤创伤愈合的过程。毛囊干细胞和其它成体干细胞一样,具有慢周期性、未分化性、自我更新和体外增殖能力强等特点。毛囊干细胞分化经毛囊干细胞(hair follicle stem cells,FSC)、短暂增殖细胞(transit amplifying cells,TAC)有丝分裂后分化细胞(postmitotic differentiating cells,PDC)三个阶段。毛囊干细胞在光镜下呈立方形,细胞体积小,核浆比率大,表面光滑,皱褶少,又被称为非锯齿形细胞,细胞体积的增大与增殖能力呈负相关。超微结构显示细胞表面有少许微绒毛,细胞核存在许多卷曲,染色质弥散分布,这些形态特征均表现出原始细胞的特性。 5.方法简介: ()实验室分离的人毛囊干细胞采用胶原酶-联合消化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的人毛囊干细胞经CK19、CD200免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-H237 换液频率每2-3天换液一次; 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性可传3-5代左右; 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠D-乳酸脱氢(D-LDH)免疫试剂盒现货供应
改良缓冲蛋白胨水(MBP) 英文名称:Modified Buffered Peptone Water 产品规格:250g
YSG培养基基础(日本标准) 英文名称: 产品规格:250g
猪白介素8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒*直销
小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)免疫试剂盒现货供应
小鼠β氨基己糖苷A(β-Hex A)免疫试剂盒现货供应
山羊血管内皮细胞生长因子(VEGF)免疫试剂盒*直销
人K1(VK1)免疫试剂盒现货供应
人类似cDNA顺
毛囊干细胞Flos chrysanthemi indici野菊花LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周HOXB2 同源盒蛋白B2抗体 规格: 0.1ml
山羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周GATA-5 GATA结合蛋白5抗体 规格: 0.1ml
Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒Ark型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-CEBP alpha (Ser21) 磷酸化转录调节因子CEBP α 抗体 规格: 0.1ml
Periconia circinata高粱根腐病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Mink IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗水貂IgG 规格: 0.1ml
Flos carthami红花PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Bcl-xL/BCL2L1/bcl-xs Bcl-xL蛋白抗体 规格: 0.1ml
Marteilia spp.马尔太虫通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PBEF(NT) 内脂素/内脏脂肪素抗体(N端) 规格: 0.1ml
Rabies Virus(RV、fixed virus)狂犬病病毒固定毒株探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Bif Bax相互作用因子1抗体 规格: 0.2ml
Fructus evodiae吴茱萸染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周CD8 CD8抗体 0.1ml
Sindbis Virus(SINV)辛德毕斯病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Mouse Anti-rat IgG/APC APC标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml
Klebsiella spp.克雷伯通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周SLC25A13 线粒体内钙结合天冬/谷载体蛋白抗体 规格: 0.2ml
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。