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操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 产品规格 | 产品货号 |
AZD 6482 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | FS-X11089 |
产品介绍:
AZD6482是PI3Kβ抑制剂,IC50为10nM,比对PI3Kδ,PI3Kα和PI3Kγ的抑制性强8,87和109倍。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! 号:1173900-33-8 别名:KIN 193 纯度:99.30% 分子量:408.45 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
泛su激活mei2(泛su激活meiE1相关蛋白抗体) UBE2
尿二磷suan葡萄糖醛suan转移mei1A9 UGT1A9
泛su样蛋白7抗体 UBL7
软骨基质相关蛋白UCMA抗体 UCMA
UBXN2B蛋白抗体 UBXN2B
上调基因4抗体(N端) URG4
泛su蛋白抗体 Ubiquitin
泛su特异性蛋白mei28抗体 USP28
尿suan盐重吸收转运子1抗体 URAT1/SLC22A11
14号染色体开放阅读框130抗体 C14orf130
尿激mei型纤溶mei原激活因子抗体 Urokinase
去泛su化mei3抗体 USP3
PI3Kβ抑制剂(AZD 6482)圆酵毛壳 Isosalvipuberulin
香菇 Isonormangostin
蕈状芽孢杆 Isomurralonginol acetate
细交链孢 Isomagnolone
无 Isodorsmanin A
热噬淀粉芽孢杆 Isocarapanaubine
红色红曲霉 Isobonducellin
浅被黑蛋巢 Icariside I hydrate
大豆慢生根瘤 山香二烯
白腐 Honyucitrin
谷棒杆 Heliangin
大肠埃希氏杆 Griffipavixanthone
酿酒酵母 Gelomulide A
枯草芽孢杆 Gardenine
头状链霉 藤黄占吨酮 E