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产品介绍：
本试剂盒是目前先进的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提小片段为180-200bp的DNA ladder，同时又可以抽提到大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。 DNA ladder也称DNA fragmentation，是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder，就可以判定细胞发生了凋亡。 样品首先被蛋白酶K消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。通过高速离心，使DNA在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过两次洗涤去除各种杂质，后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15分钟即可完成。 通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚抽提酒精沉淀方法更加便捷，小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A，可以获得不含RNA的高纯度总DNA，排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。 本试剂盒每次多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多，反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA，每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA，每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA，每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量，样品用量好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。 对于培养细胞的凋亡检测，通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。 试剂盒组份： 样品裂解液A——————10ml 样品裂解液B——————11ml 洗涤液I——————21ml(第一次使用前加入7ml无水乙醇) 洗涤液II——————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇) 洗脱液——————22ml 蛋白酶K——————1.1ml RNase A——————220μl DNA纯化柱及废液收集管——————50套 储存条件：室温，有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存) |
产品属性：
产品名称 | 英文名称 | 产品规格 | 产品货号 |
DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column | 50次 | FS-X9526 |
注意事项：
1、本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性，则测定不含细胞，仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入 MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育 1 小时即可，白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测，MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
操作步骤：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
氨酸脱氢酶2(PRODH2)检测试剂盒 forProlineDehydrogenase2(PRODH2)
鳄失调蛋白(ATCAY)检测试剂盒 forCaymanAtaxia(ATCAY)
基质金属蛋白酶8(MMP8)检测试剂盒 forMatrixMetalloproteinase8(MMP8)
纤维蛋白肽A(FPA)检测试剂盒 forFibrinopeptideA(FPA)
纤维蛋白原相关蛋白1(FGL1)检测试剂盒 forFibrinogenLikeProtein1(FGL1)
生长分化因子2(GDF2)检测试剂盒 forGrowthDifferentiationFactor2(GDF2)
泛醌蛋白4(UBQLN4)检测试剂盒 forUbiquilin4(UBQLN4)
蛋白激酶Cε(PKCε)检测试剂盒 forProteinKinaseCEpsilon(PKCe)
矢车菊苷β6(CENTβ6)检测试剂盒 forCentaurinBeta6(CENTb6)
Calicin蛋白(CCIN)检测试剂盒 forCalicin(CCIN)
TGFβ诱导早期应答基因1(TIEG1)检测试剂盒 forTGFBetaInducibleEarlyResponseGene1(TIEG1)
组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)检测试剂盒 forTissueInhibitorsOfMetalloproteinase2(TIMP2)
白介素31(IL31)检测试剂盒 forInterleukin31(IL31)
线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)检测试剂盒 forGlycerol-3-PhosphateAcyltransferase,Mitochondrial(GPAM)
甘胺酸-N-甲基转移酶(GNMT)检测试剂盒 forGlycine-N-Methyltransferase(GNMT)
胱天蛋白酶8(P8)检测试剂盒 forCaspase8(P8)
和肽素(CPP)检测试剂盒 forCopeptin(CPP)
细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)来酸溴苯那敏标准品 规格:125mg 英文名称：Brompheniramine Maleate
S-腺苷-L-高半氨酸标准品 规格:50mg 英文名称：S-Adenosyl-L-Homocysteine
托拉唑相关物质C标准品 规格:20mg 英文名称：
戊酸雌二醇标准品 规格:100mg 英文名称：Estradiol Valerate
二硫化四乙基秋兰姆标准品 规格:200mg 英文名称：Disulfiram
内酯相关物质A标准品 规格:100mg 英文名称：
囊素标准品 规格:200mg 英文名称：Allantoin
苄星头孢匹林标准品 规格:100mg 英文名称：Cephapirin Benzathine
苍白松果菊标准品 规格:1g 英文名称：
吡酯标准品 规格:150mg 英文名称：Topiramate
