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产品介绍:
用途: 尿沉渣染色检查 注意事项: 染色后红细胞呈红色或无色,白细胞呈深蓝、淡蓝或无色。 储存条件:4℃,避光,12个月 |
中文名称:尿沉渣染色液(Sternheimer法)
英文名称:
产品规格:50ml|100ml
货号:FS-X9925
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
污黑腐皮壳螺旋一环一螺旋蛋白5抗体Human GPR107 小鼠白活化黏附因子(ALCAM)免疫试剂盒
绿色链霉菌二磷3核抗体Human GPR108 小鼠白三烯E4(LTE4)免疫试剂盒
微小杆菌脑蛋白丝/苏激29抗体Human GPR116(G-protein coupled receptor 116) 小鼠白三烯D4(LTD4)免疫试剂盒
灵芝智力发育调节相关蛋白BRWD3抗体Human GPR123 小鼠白三烯C4(LTC4)免疫试剂盒
水溶性非食用色快速筛查盒生物抗体Human GP repeat 小鼠白三烯B4(LTB4)免疫试剂盒
蝉拟青霉Bax相互作用因子1抗体Human GPAA1 小鼠白介9(IL-9)免疫试剂盒
高地芽孢杆菌表皮生长因子反应蛋白2抗体Human GPATCH2 小鼠白介8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒
平菇BCL2相关X蛋白抗体Human GPBP1 小鼠白介7(IL-7)免疫试剂盒
蜡样芽孢杆菌Bcl2样凋亡蛋白13抗体Human GPATCH4(G patch domain-containing protein 4) 小鼠白介6(IL-6)免疫试剂盒
金黄壳囊孢菌Bcl2样凋亡蛋白14抗体Human GTF2A2 小鼠白介-5(IL-5)免疫试剂盒
斑玉蕈Bcl2蛋白修饰因子抗体Human GTF2E1 小鼠白介4(IL-4)免疫试剂盒
金针菇(毛柄金钱菌、冬菇)骨形态发生蛋白11抗体Human GTF2F1 小鼠白介35(IL-35)免疫试剂盒
大肠埃希菌BCL2样15促凋亡蛋白抗体Human GSG1L 小鼠白介33(IL-33)免疫试剂盒
蓝色犁头霉骨碱性磷抗体Human GSDMD 小鼠白介31(IL-31)免疫试剂盒
葡萄座腔菌磷化T淋巴连接蛋白抗体Human GSPT1 小鼠白介3(IL-3)免疫试剂盒
金耳、 黄木耳磷化T淋巴连接蛋白抗体Human GSPT2 小鼠白介2受体β(IL2rb/CD122)免疫试剂盒
固氮菌Azotobacter│sp. 质量规格:BRβ胶原交联试剂盒人参皂Rk3
轮枝孢Verticillium│sp. 质量规格:>98.5%,BRβ-肌动蛋白试剂盒人参炔
詹氏杆菌Propionibacterium│jensenii 质量规格:>98%,BRβ-黑色激试剂盒肉豆寇单甘油酯
尿沉渣染色液(Sternheimer法)云芝栓孔 (变色栓) 十八烷基乙烯基尿镉-金属硫蛋白
假单胞 3-硝基-4-羟氨基氨基肽
罗伊氏乳杆 二乙二单乙烯基补体因子H相关蛋白3
大斑凸脐蠕孢 4-(3-吡啶基)苯频哪酯磷糖异构1
喜乳糖拟泡囊担孢酵母 7-氨基庚白分化抗原CD109
谷棒杆Ⅲ型 3-溴-6--2-吡啶甲球蛋白重链可变区
大肠埃希 顺-2-已烯-1-Igκ链V-I区HK102
黑附球 3-甲基-2-硝基三氟甲苯凝胶溶
无花果曲霉 叔丁基二苯基硅烷基三氟甲磺酯α黑色
锈赤蜡黄链霉 3-溴-5-三氟甲苯受体相互作用蛋白
膜醭假丝酵母 5-溴-2--3-吡啶CXC趋化因子受体7
碱线属 3-羟基十六烷CXC趋化因子受体4
Rhizobium multihospitium 基溴化镁(约的四溶液,约2mol/L)14-3-3蛋白beta
甘蔗生节棱孢 4--1-14-3-3蛋白gamma
根瘤 3-羟基-2-萘甲酰基-邻-乙氧基苯14-3-3epsilon