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产品介绍:
用途: 抗酸菌(诺卡菌和红球菌等)染色,可鉴别抗酸菌与非抗酸菌 注意事项: 抗酸菌或弱酸菌(诺卡菌和红球菌等)呈红色,非抗酸杆菌和背景呈浅蓝色。主要由复红液、脱色液组成。 储存条件:室温,避光,12个月 |
中文名称:抗酸染色液(改良Kinyoun冷染法)
英文名称:
产品规格:3×50ml|3×100ml
货号:FS-X10119
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
稀奇链霉菌谷受体KA1抗体Human PTN(Pleiotrophin) 人3-硝基酪(3-NT)免疫试剂盒
白色假丝酵母*真核翻译起始因子3K抗体Human KLKB1 (Plasma kallikrein) 人3-羟基-3-甲基戊二酰合1(HMGCS1)免疫试剂盒
小青霉早期生长反应蛋白3抗体Human TFCP2(Alpha-globin transcription factor CP2) 人3-葡萄糖孕二(PdG)免疫试剂盒
薄层菌EMSY蛋白抗体Human LBX1 (Transcription factor LBX1) 人Ⅱ型前胶原羧基端肽(PⅡCP)免疫试剂盒
细疣篮状菌FBXO36 F-box蛋白相关蛋白36抗体Human ANOS1 (Anosmin-1) 人Ⅱ型前胶原N端前肽(PⅡNP)免疫试剂盒
亮白曲霉T1蛋白抗体Human LMNA(Lamin-A) 人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)免疫试剂盒
金龟子绿僵菌RAB6蛋白抗体Human BAG6(Large proline-rich protein BAG6) 人Ⅱ型胶原交联C端肽(CTX-Ⅱ)免疫试剂盒
蜡状芽孢杆菌皮卡丘抗体Human THOP1(Thimet oligopeptidase) 人Ⅱ型胶原代谢产物C2C(C2C)免疫试剂盒
折叠马赛菌ELAVL4蛋白抗体Human FTMT(Ferritin, mitochondrial) 人Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫试剂盒
棘孢木霉表皮生长因子样激受体1Human LTBP4 (Latent-transforming growth factor beta-binding protein 4) 人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)免疫试剂盒
葡萄园有孢汉逊酵母磷化丝裂原活化蛋白激1/2抗体Human KDELC1 (KDEL motif-containing protein 1) 人Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6/MUC1)免疫试剂盒
坚强芽孢杆菌电子转移黄蛋白α抗体Human INIP (SOSS complex subunit C) 人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)免疫试剂盒
栅栏拟诺卡氏菌前列腺E受体蛋白4抗体Human IQUB (IQ and ubiquitin-like domain-containing protein) 人26S蛋白体非ATP调节亚基11(PSMD11)免疫试剂盒
食碱戈登氏菌风疹病糖蛋白抗体Human TTPA(Alpha-tocopherol transfer protein) 人25羟基维生D3(25 HVD3)免疫试剂盒
串泡双型毛霉细小变种EFR3A蛋白抗体Human ISOC2 (Isochorismatase domain-containing protein 2) 人25羟基维生D2(25 HVD2)免疫试剂盒
谷棒杆菌ENAH蛋白抗体Human ICA1(Islet cell autoantigen 1) 人20S蛋白体(20SP)免疫试剂盒
天山中慢生根瘤菌Mesorhizobium│tianshanense 质量规格:Standard for GC,≥99%(HPLC)杨
砂单胞菌Arenimonas│oryziterrae 质量规格:分析标准品,≥99.5%(HPLC)对羟基丁酯
: HBUM77348资源名称: 链霉菌 质量规格:用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)对羟基酯
抗酸染色液(改良Kinyoun冷染法)*松乳菇 1-(4-基)-3-甲基-5-吡唑啉酮环磷鸟
乌饭树拟茎点霉 2,5-二溴己二二乙酯NADH还原
豇豆慢生根瘤 4-溴邻苯二甲酐色C还原
阪崎肠杆 亚磷二甲酯布鲁东氏酪激
淡黄曲霉 5-吡啶-2-羧铜锌超氧化物歧化
黑曲霉 DL-2-甲基丁甲酯L-天冬氧化
裂孔平伏 2-特戊酰氨基-6-皮考啉交替氧化
菊苣假单胞 2-特戊酰基吡啶脱氢
酿酒酵母 1-萘基异酯V型ATP
烟芽孢杆 5-氟-2-异亚基氨基氧苯脱氧核糖核
枯草芽孢杆 溴二二甲酯透明质
酿酒酵母 钠固氮
华根霉 3,5-二甲基-1-氢-吡咯-2-羧叔丁酯-4-羧乙酯条纹花叶病
黄伞(可订购) 2-溴二苯并呋喃线条花叶病
毕赤酵母 3,4-二肼盐盐1.6二磷果糖