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上海市所在地
中文名称:嗜酸性粒细胞稀释液(计数液)
英文名称:
产品规格:100ml
货号:FS-X9923
产品介绍:
用途: 用于嗜酸性粒细胞计数 注意事项: 由桃红等组成。 储存条件:4℃,6个月 |
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
脑膜炎奈瑟菌支链基转2抗体Human GSG1L 小鼠层连蛋白/板层(LN)免疫试剂盒
金龟子绿僵菌BCL2相关蛋白A1抗体Human GSPT2 小鼠草膦乙酰转移(PAT)免疫试剂盒
谷棒杆菌B淋巴瘤蛋白3抗体Human GPRIN3 小鼠不对称二甲基精(ADMA)免疫试剂盒
酿酒酵母转录因子MYB相关蛋白B抗体Human GPS2 小鼠补体因子H(CFH)免疫试剂盒
腐生葡萄球菌腐生亚种防御β1/Defensin β1抗体Human GPSM2 小鼠补体片断5a(C5a)免疫试剂盒
酿酒酵母B活化因子受体抗体Human GPX4 小鼠补体片断3a(C3a)免疫试剂盒
喜肌费尔酵母TNF家族B激活因子抗体Human GPX7 小鼠补体蛋白5(C5)免疫试剂盒
橄榄链霉菌蛇巴曲抗体Human GPX5 小鼠补体蛋白4(C4)免疫试剂盒
青紫黑链霉菌大脑蛋白2抗体Human GPX8 小鼠补体蛋白3(C3)免疫试剂盒
猪链球菌分型血清参考品 血清型 SS34程序性死亡配体1抗体Human GRAMD1B 小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)免疫试剂盒
乳微杆菌B7-H4抗体Human GRAMD4 小鼠波形蛋白(VIM)免疫试剂盒
小马勃3-2β分泌抗体Human GRB7 小鼠型肝炎抗体(IgG)免疫试剂盒
东方伊萨酵母相关死亡促进因子Bad抗体Human GRHPR(Glyoxylate Reductase/Hydroxypyruvate Reductase) 小鼠激M2型同工(M2-PK)免疫试剂盒
冷湖黄杆菌BaxHuman GRID1 小鼠激(PK)免疫试剂盒
少根根霉程序性死亡配体2抗体Human GPS2 小鼠二酰脱羧,线粒体(MLYCD)免疫试剂盒
解蛋白弧菌胆汁盐输出泵/ATP结合盒转运蛋白11抗体Human GPSM2 小鼠二单酰(malonyl CoA) 免疫试剂盒
44958=JCM12462资源名称: 氧化假诺卡氏菌 质量规格:纯度(铜):52.5~56.5%β葡萄糖试剂盒3,4,5-三氧基
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:>99%,BRβ葡萄糖试剂盒3,4,5-三氧基酯
猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 质量规格:(Cu):36.0~38.0%,Tech Gradeβ萘试剂盒杨酯
嗜酸性粒细胞稀释液(计数液)冬虫夏草 化铬(III)混合谱系激域样蛋白
酿酒酵母 西替汀受体TNFRSF结合丝苏激1
哈茨木霉 2-溴-6-高亲和力球蛋白ε受体α亚基
蓝绿小四孢 反式茴香脑硫对甲
酿酒酵母 鹅去氧胆红补体受体1
枯草芽孢杆 2-乙酰基-1-甲基吡咯胶质源性连接蛋白
短双歧杆 和厚朴γ-分泌
西班牙糖丝 大豆元糖还原
匍枝根霉原变种 2-甲氨基嘧啶载脂运载蛋白-1
桂花地霉 2-异基硫杂蒽酮芳香二烷基磷
竹喙球 槐角腮腺炎病抗原
黄柄曲霉 2-萘磺酰兰尼碱受体2
鲑色锁掷酵母 醋成纤维生长因子受体3
Deinococcus 5-溴-2-氟-3-吡啶羧甲酯性磷
藤黄孢链霉 磷奥他韦酯D