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培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：活细胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
英文名称：Hoechst 33342 Living Cell Staining Solution
产品规格：0.1ml|0.5ml|3ml
货号：FS-X9554
产品介绍:
本品是一种适用于活细胞细胞核染色的溶液。仅需染色10分钟就能用荧光显微镜观察到非常明亮的细胞核蓝色荧光染色。 本产品也适用于固定后的细胞或组织的细胞核染色。 ：23491-52-3 分子式：C27H28N6O·3HCl·3H2O 分子量：615.99 激发和发射波长：346nm，460nm 激发和发射波长(和双链DNA结合后)：350nm，461nm Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。 正常培养的HeLa细胞用本产品染色后的实拍效果图。图A为正常细胞Hoehst 33342的染色效果图。图B中除了正常细胞外，还清晰可见呈现致密浓染的凋亡细胞。 储存条件：-20℃避光，有效期一年。 |
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移mei11(GALNT11)检测试剂盒 forPolypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase11(GALNT11)
ⅩⅢA1肽(F13A1)检测试剂盒 forCoagulationFactorXIIIA1Polypeptide(F13A1)
Ⅱ型胶原(COL2)检测试剂盒 forCollagenTypeII(COL2)
组织蛋白meiK(CTSK)检测试剂盒 forCathepsinK(CTSK)
载脂蛋白B100(APOB100)检测试剂盒 forApolipoproteinB100(APOB100)
Malectin蛋白(MLEC)检测试剂盒 forMalectin(MLEC)
MAX交互子1(MXI1)检测试剂盒 forMAXInteractor1(MXI1)
CD320分子(CD320)检测试剂盒 forClusterOfDifferentiation320(CD320)
Trihydrophobin1蛋白(TH1)检测试剂盒 forTrihydrophobin1(TH1)
半乳糖变旋mei(GALM)检测试剂盒 forGalactoseMutarotase(GALM)
三叶因子2(TFF2)检测试剂盒 forTrefoilFactor2(TFF2)
谷丙转氨mei(ALT)检测试剂盒 forAlanineAminotransferase(ALT)
冠蛋白1A(CORO1A)检测试剂盒 forCoronin1A(CORO1A)
细胞间粘附分子4(ICAM4)检测试剂盒 forIntercellularAdhesionMolecule4(ICAM4)
肽mei抑制因子15(PI15)检测试剂盒 forPeptidaseInhibitor15(PI15)
补体成分5a(C5a)检测试剂盒 forComplementComponent5a(C5a)
血管内皮生长因子A(VEGFA)检测试剂盒 forVascularEndothelialGrowthFactorA(VEGFA)
活细胞染色液(Hoechst 33342)(100×)fu西汀相关物质A标准品 规格:15mg 英文名称：
霉酚suan酯相关物质B标准品 规格:15mg 英文名称：
2-丁tong¤标准品 规格:1.2ml×3ampules 英文名称：Methyl Ethyl Ketone
仲丁chun标准品 规格:1.2ml×3ampules 英文名称：2-Butanol
2-jia基-1-丙chun标准品 规格:1.2ml×3ampules 英文名称：2-Methyl-1-propanol
fu马西尼标准品 规格:200mg 英文名称：Flumazenil
盐suan特比萘芬标准品 规格:200mg 英文名称：Terbinafine Hydrochloride
紫杉chun相关物质B标准品 规格:20mg 英文名称：
卡立普多标准品 规格:1g 英文名称：Carisoprodol
他啶五水合物标准品 规格:300mg 英文名称：Ceftazidime Pentahydrate
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
