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产品介绍:
RG2833是一种大脑渗透的HDAC抑制剂，抑制HDAC1和HDAC3的活性，IC50值分别为60nM和50nM。 注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！ 号：1215493-56-3 别名：RGFP109 纯度：99.43% 分子量：339.43 储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
中文名称：HDAC抑制剂(RG2833)
英文名称：RG2833
产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
货号：FS-X10861
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
芽胞杆菌小鼠α半乳糖基抗原Anti-RAB29 Antibody人蛋白S(Protein S)
郝氏青霉大鼠胃肠癌标志物CA199Anti-RAB2B Antibody人蛋白S(Protein S)
福山假丝酵母人幽门螺旋杆菌IgMAnti-RAB31 Antibody人可溶性血管内皮蛋白C受体(sEPCR)
虫草大鼠血红氧合1Anti-RAB29 Antibody人可溶性血管内皮蛋白C受体(sEPCR)
恶臭假单胞菌小鼠β基己糖AAnti-RAB33A Antibody人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)
人相关蛋白AAnti-RAB35 Antibody人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)
顶头孢霉大鼠磷脂A2Anti-RAB34 Antibody人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)
白绒红蛋巢菌小鼠肺表面活性物质相关蛋白AAnti-RAB37 Antibody人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)
焦曲霉小鼠克拉拉蛋白Anti-RAB38 Antibody人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)
总状共头霉大鼠组织因子途径抑制物Anti-RAB40B Antibody人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)
耐辐射奇球菌人胃抑Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)
散囊菌小鼠β半乳糖Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)
烟曲霉大鼠水通道蛋白5Anti-RAB3GAP1 Antibody人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)
酿酒酵母人胃泌释放多肽Anti-RAB3IP Antibody人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)
光滑青霉人胃泌释放肽前体Anti-RAB41 Antibody人Na+/H+交换体3(NHE3)
茯苓小鼠肾上腺Anti-RAB40B Antibody人Na+/H+交换体3(NHE3)
跨膜蛋白6B抗体美国大钟菇人膀胱移行细胞乳头瘤细胞
肿瘤坏死因子诱导蛋白3相互作用蛋白1抗体青黄褐硬皮马勃pCDNA3.1-his-TNFRSF4
瞬时受体电位通道蛋白4抗体地星TNFRSF4人源基因
神经元蛋白22抗体褐疣柄牛肝菌人小细胞肺癌细胞
HDAC抑制剂(RG2833)粉拟青霉 (S)-(-)-2-甲基-1-丁三叶因子
黑曲霉 3%NaCl阿拉伯糖主要组织相容性复合体Ⅱ类
果蔬汁 莠灭净、嘧霉、乙酰磷、 多灵、死蜱、菊酯 3%NaCl胰胨水中性粒明胶相关脂质运载蛋白
网状镰孢 3%NaCl甘露氨肽N
枯草芽孢杆枯草亚种 9-溴蒽二肽基肽Ⅳ
*松乳菇 3%NaCl蔗糖γ-谷氨酰转肽
虫花棒束孢 3%NaCl阿拉伯糖氨肽A
乳乳球乳亚种 3%NaCl乳糖尿氮
华特拉根瘤 [1,3-双(二苯基膦)烷]二化镍(II)肠三叶因子
枯草芽孢杆 %NaCl胰胨水Na-K-ATP
Rhizobium miluonense 7%NaCl胰胨水层粘连蛋白
球座尾孢 无盐胰胨水Ⅳ型胶原
肠膜明串珠 麦芽糖维生B12
酿酒酵母 1-溴-2,3,5,6-四氟苯口蹄疫病非结构蛋白3ABC抗体
柄篮状 葡萄糖二肽基肽Ⅳ
