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产品介绍:
Irbinitinib(ARRY-380;ONT-380)是高效的选择性的HER2抑制剂，IC50值为8nM。 注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！ 号：937263-43-9 别名：ARRY-380;ONT-380 纯度：99.57% 分子量：480.52 储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
中文名称：HER2抑制剂(Irbinitinib)
英文名称：Irbinitinib
产品规格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
货号：FS-X10654
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
乳杆菌属Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBA2 Antibody动力蛋白胞浆1重链1(DYNC1H1)
绒毛青霉辣根过氧化物标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBB Antibody顶体蛋白(ACR)
柄杆菌生物标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE2I Antibody凋亡抑制因子5(API5)
尖孢镰刀菌碱性磷（AP）标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBD Antibody凋亡信号调节激I(ASK1)
生癌肠杆菌胶体金标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBB Antibody(PB0182)淀粉样蛋白β前体样蛋白2(APLP2)
大肠杆菌Cy3标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE2I Antibody淀粉样蛋白β前体样蛋白1(APLP1)
白僵菌Cy5标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE2I Antibody淀粉样蛋白β1-42(Aβ1-42)
土曲霉金色变种Cy5.5标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE2Q2 Antibody淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)
地衣芽孢杆菌Cy7标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE3A Antibody淀粉γ(Amyγ)
嗜盐动性球菌PE标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBR2 Antibody淀粉β(Amyβ)
三叶草根瘤菌罗丹明标记的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UCP2 Antibody淀粉α(Amyα)
木贼镰孢罗丹明标记的兔抗猴IgGAnti-UCHL1 Antibody电子转移黄蛋白β肽(ETFβ)
麦根腐平脐蠕孢FITC标记的兔抗猴IgGAnti-UCP2 Antibody电子转移黄蛋白α肽(ETFα)
平菇(南京1号)胶体金标记的兔抗猴IgGAnti-UCP1 Antibody电子传递黄蛋白脱氢(ETFDH)
青霉 碱性磷（AP）标记的兔抗猴IgGAnti-UGCG Antibody电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)
哈茨木霉生物标记的兔抗猴IgGAnti-UCP3 Antibody电碳氢钠协同转运蛋白4(NBC4)
腺硫激1抗体食菌小鼠肺大动脉组织提取物
腺硫激2抗体短波单胞菌小鼠肺大静脉组织提取物
MAWD结合蛋白抗体多头霉小鼠肺组织提取物
PCID1蛋白抗体掘氏疫霉小鼠关节软骨组织提取物
HER2抑制剂(Irbinitinib)枯草芽孢杆 6-甲氧基-1-萘满酮顶体
意外链霉 3-(三氟甲氧基)氟苯对氧磷1
罗伊氏乳杆 1,4-环己烷二羧（CHDA）二氧化
酿酒酵母 5-甲氧基-2-甲基非酯化脂肪
毛霉属 二甲基双十八烷基化分泌型球蛋白A
大肠埃希 N-叔丁基烯酰甘
球孢白僵 戊唑甘油磷
樟疫霉 -4-甲甘油三酯
E.coli EPI400 邻苯二甲酰亚肝结合性表皮生长因子
产肠大肠埃希氏 1,4-二溴-2,5-二肝脂
白浅灰链霉 2-甲基-2,4-戊二(MPD)干扰Tau
中国汉纳酵母 4-(甲硫基)高迁移率族蛋白B1
樟疫霉 硬酯铅睾酮
黄杆 硬酯铅谷
枯草芽孢杆 己二二酰肼核心蛋白聚糖
