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产品名称 | 人膀胱癌细胞:5637 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
分类 | 细胞系 |
货号 | GOY-01X0002 |
商品介绍:
名称5637 (人膀胱癌细胞) (STR鉴定正确) 种属人类 年龄(性别)男性,68岁 组织来源膀胱;癌 生长特性贴壁细胞 细胞形态上皮细胞样 背景描述5637细胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。 生物安全等级1 生长培养基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例1:3-1:4 推荐换液频率2~3次/周 倍增时间~24-36小时 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ 致瘤性Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. 注意事项该细胞较难消化,注意延长消化时间,消化到细胞收缩变圆,轻拍培养瓶侧边,细胞可以滑落方可终止消化。 |
使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
AR42J (大鼠胰腺外分泌细胞) 大鼠胰腺外分泌细胞:AR42J 1×10⁶cells/T25培养瓶
ARPE-19 (人视网膜上皮细胞) 人视网膜上皮细胞:ARPE-19 1×10⁶cells/T25培养瓶
AsPC-1 (人转移胰腺腺癌细胞) 人转移胰腺腺癌细胞:AsPC-1 1×10⁶cells/T25培养瓶
AtT-20 (小鼠垂体瘤细胞) 小鼠垂体瘤细胞:AtT-20 1×10⁶cells/T25培养瓶
B16 (小鼠黑色素瘤细胞) 小鼠黑色素瘤细胞:B16 1×10⁶cells/T25培养瓶
Bcap-37 (人乳腺癌细胞) 人乳腺癌细胞:Bcap-37 1×10⁶cells/T25培养瓶
BEL-7402 (人肝癌细胞) 人肝癌细胞:BEL-7402 1×10⁶cells/T25培养瓶
BEL-7404 (人肝癌细胞) 人肝癌细胞:BEL-7404 1×10⁶cells/T25培养瓶
BGC-823 (人胃腺癌细胞(低分化)) 低分化:BGC-823 1×10⁶cells/T25培养瓶
BHK-21 [C-13] (仓鼠肾成纤维细胞) 仓鼠肾成纤维细胞:BHK-21 [C-13] 1×10⁶cells/T25培养瓶
BIU-87 (人膀胱癌细胞) 人膀胱癌细胞:BIU-87 1×10⁶cells/T25培养瓶
BRL 3A (大鼠肝细胞) 大鼠肝细胞:BRL 3A 1×10⁶cells/T25培养瓶
BNL CL.2 (小鼠胚胎肝细胞) 小鼠胚胎肝细胞:BNL CL.2 1×10⁶cells/T25培养瓶
BRL (大鼠肝细胞) 大鼠肝细胞:BRL 1×10⁶cells/T25培养瓶
BS-C-1 (非洲绿猴肾细胞) 非洲绿猴肾细胞:BS-C-1 1×10⁶cells/T25培养瓶
BT-474 [BT474] (人乳腺导管癌细胞) 人乳腺导管癌细胞:BT-474 [BT474] 1×10⁶cells/T25培养瓶
BT-549 (人乳腺管癌细胞) 人乳腺管癌细胞:BT-549 1×10⁶cells/T25培养瓶
BxPC-3 (人原位胰腺腺癌细胞) 人原位胰腺腺癌细胞:BxPC-3 1×10⁶cells/T25培养瓶
C127 [C-127] (小鼠乳腺肿瘤细胞) 小鼠乳腺肿瘤细胞:C127 [C-127] 1×10⁶cells/T25培养瓶
C2C12 (小鼠成肌细胞) 小鼠成肌细胞:C2C12 1×10⁶cells/T25培养瓶
血管紧张素1转换酶抑制剂抗体
拮抗凋亡转录因子抗体
α-1抗胰抗体
α-1抗体
ATP结合蛋白家族6抗体
三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗体
脂联素受体2抗体
ANGEL1蛋白抗体
ANGEL2蛋白抗体
ANKLE2蛋白抗体
睾丸特异性锚样蛋白1抗体
锚蛋白重复结构域蛋白13B抗体
锚蛋白重复结构域蛋白20A1抗体
锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体
锚蛋白重复结构域蛋白22抗体
锚蛋白重复结构域蛋白50抗体
氢离子转运ATP合成酶6G抗体
锚蛋白重复结构域蛋白26抗体
锚蛋白重复结构域蛋白26抗体
丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体
人膀胱癌细胞:5637芳香基硫酸酯酶K抗体
神经元突触前膜蛋白抗体
锚定蛋白G抗体
肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体
整合素样金属蛋白酶与型抗体