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产品名称 | 小鼠肠系膜平滑肌细胞 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
分类 | 原代细胞 |
货号 | GOY-01X1402 |
商品介绍:
名称 小鼠肠系膜平滑肌细胞 2.组织来源:肠系膜组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠肠系膜平滑肌细胞分离自肠系膜动脉组织;肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中最长的一段,也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。肠系膜动脉由背大动脉发出的走行在肠系膜内,分布于消化管的动脉。分成肠系膜上动脉和肠系膜下动脉。前者主要分布于小肠左侧,后者分布于结肠、大肠、泄殖腔等处。肠动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。 5.方法简介: ()实验室分离的小鼠肠系膜平滑肌细胞采用中性-胶原酶联合消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的小鼠肠系膜平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M311 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传2-3代左右 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
盐四环素(标准品) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Tetracycline hydrochloride 小鼠角膜上皮细胞*培养基100mL
大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷;P 订购|咨询 规格: 20mg ELISA Kit for Pig Insulin小鼠垂体腺苷环化激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒,英文名:ADCYAP1 ELISA Kit
K1 质量规格:>98.0%,油状 Vitamin K1 人状腺滤泡上皮细胞*培养基100mL
地肤子皂苷Ic 订购|咨询 规格: HPL
小鼠肠系膜平滑肌细胞TSA 琼脂进口、国产TSA agar用于奶粉中坂崎杆菌的纯化培养(FDA方法)250兔子核因子κB(NF-κB)免疫试剂盒现货供应
胰蛋白胨大豆肉汤 进口、国产Trypticase (Tryptic) Soy Broth用于菌的MPN测定,增菌培养,NaCl浓度可根据需要而调整(GB、SN标准)250兔子胱天蛋白3(Casp-3)免疫试剂盒*直销
Baird-Parker琼脂基础 进口、国产Baird-Parker Agar Base用于菌的选择性分离培养(GB、SN标准)250兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫试剂盒进口、组装
亚碲酸盐卵黄增菌液 进口、国产Egg-Yolk Tellurite Emulsion加入Baird-Parker琼脂基础中5ml*10兔子骨涎蛋白(BSP)免疫试剂盒进口、分装
兔血浆 进口、国产Rabbit Plasma用于菌凝固试验0.5ml*20兔子骨胶原交联/Ⅰ型胶原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)免疫试剂盒现货供应
DNA琼脂 进口、国产DNase Agar用于核糖核酸检测100兔子骨胶原交联(Cr)免疫试剂盒*直销
7.5%氯化钠肉汤 进口、国产7.5% Sodium Chloride Broth用于菌的增菌培养(GB标准)250兔子骨碱性(BALP)免疫试剂盒进口、组装
普通肉汤培养基 进口、国产Broth Medium用于菌的增菌培养(SN标准)250兔子甘肽还原(GR)免疫试剂盒进口、分装
肠毒素产毒培养基进口、国产用于菌肠毒素产毒试验250兔子甘肽过氧化(GSH-Px)免疫试剂盒现货供应
亚碲酸钠肉汤培养基基础 进口、国产Sodium Tellurite Broth Base用于菌的增菌培养。每100ml培养基需另加入1%亚碲酸钠1ml250兔子甘肽(GSH)免疫试剂盒*直销