兔滑膜细胞
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具体成交价以合同协议为准
2022-05-16 12:01:14
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上海谷研实业有限公司

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产品简介

兔滑膜细胞公司正在出售的产品:100U Therminator II DNA 聚合 Therminator II DNA Polymerase -20℃保存500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH9.5 Phosphate Buffer,0.2M, pH9.5 常温保存100次 DNA快速连接试剂盒 Rapid DNA Ligation Kit -20℃保存2 ug

详细介绍

公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称

兔滑膜细胞

规格

5×10⁵Cells/T25培养瓶

分类

原代细胞

货号

GOY-01X0756

商品介绍:

名称 兔滑膜细胞

2.组织来源:滑膜组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

兔滑膜细胞分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构,同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征,其病理改变累及关节的各个组成部分,但绝不仅局限于软骨,还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响,相互作用,共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的最大细胞群体,是维持关节正常功能的重要组织结构,它包埋在颗粒状无定性的基质中,基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能:滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关;滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏;是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。

5.方法简介:

()实验室分离的兔滑膜细胞采用混合酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

()实验室分离的兔滑膜细胞Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产品货号CM-Rb017

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳

消化液0.25%

培养条件气相:空气,95%CO25%

使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

 

培养操作:

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
图片13.jpg

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

2 ug pEE12 pEE12 低温运输,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人唾液酸转运蛋白(Sialin)ELISA试剂盒

小肠结肠炎耶尔森氏菌成套生化鉴定管  10种*2套/盒*5盒 1.56-100 ng/mL 人转氨2/谷丙转氨2(ALT2/GPT2)ELISA试剂盒

25g 牛胆酸钠 Taurocholic Acid Sodium Salt 室温干燥保存 0.625-40 U/L 人主动脉平滑肌肌动蛋白(Actin, aortic smooth muscle)ELISA试剂盒

50T

兔滑膜细胞2 ug pCMV-SPORT6 DNAJC7 pCMV-SPORT6 DNAJC7 低温运输,-20℃保存

BRLF1  EBV立即早期基因BRLF1抗体 0.2ml

Goat Anti-human IgG/Cy5  Cy5标记的羊抗人IgG 规格: 0.1ml

Cystatin S  胱抑素S/半蛋白抑制剂S抗体 规格: 0.2ml

SLC33A1  乙酰辅A转运蛋白1抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗马IgG 规格: 0.1ml

EpCAM/CD326  上皮细胞粘附分子抗体 规格: 0.1ml

Desmocollin 2  桥粒糖蛋白2/桥粒糖蛋白3抗体 0.1ml

CCDC7  卷曲螺旋结构域蛋白7抗体 规格: 0.2ml

p400  p400蛋白抗体 规格: 0.2ml

ADO  2-氨基乙硫醇双加氧抗体 规格: 0.2ml

TBX1/Brachyury  先心相关蛋白TBX1抗体 规格: 0.2ml

10mL β- 巯基乙醇,蛋白级 β-Mercaptoethanol,Protein Grade 常温保存

 


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