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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 100管/96样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6918 |
商品介绍:
测定意义
总磷酸盐包含正磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐等各种磷酸盐的形式,反应了水土中的磷酸盐水平,是一个水质和土壤质量评价的重要指标。
测定原理
在酸性溶液中,在分解剂和高温条件下,将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正磷酸盐,正磷酸盐可与钼酸铵反应成磷钼酸,在还原剂存在时被还原为磷钼蓝,在710nm处有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品
天平,震荡仪、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
GADD153抗体Human RFNG (Beta-1,3-N-acetylglucosaminyltransferase radical fringe) ELISA KIT人胃蛋白(PP)ELISA试剂盒,
中间丝蛋白β-synemin抗体Human SASH1(SAM and SH3 domain-containing protein 1) ELISA Kit人糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒,
MAP激激活死亡域蛋白4C抗体Human SASH3 (SAM and SH3 domain-containing protein 3) ELISA KIT人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA试剂盒,
桥粒糖蛋白4抗体Human RHO (Rhodopsin) ELISA KIT小鼠上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒,
动力蛋白3抗体Human RBPMS2 (RNA-binding protein with multiple splicing 2) ELISA KITRVS 肉汤
δ连环蛋白/δ连环素/δ链接素(δ-catenin)抗体Human SERGEF (Secretion-regulating guanine nucleotide exchange factor) ELISA KIT1 0%NaCl胰胨水
胞浆接头蛋白Dok6抗体Human SELPLG (P-selectin glycoprotein ligand 1) ELISA KITα-淀粉(枯草杆)
胞浆接头蛋白Dok5抗体Human ALOX15B(Arachidonate 15-lipoxygenase B) ELISA Kit8-甲氧基补骨脂素 8-Methoxypsoralen
水土中总磷酸盐微量法检测试剂盒大鼠红细胞生成素受体(EPOR)免疫试剂盒现货供应
绵羊巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)免疫试剂盒进口、组装
大鼠组织型纤溶原激活剂(t-PA) 免疫试剂盒*直销
鸡胰岛素样生长因子2(IGF2)免疫试剂盒现货供应
肉碱O-棕榈酰基转移1,肝亚型(CPT1A/CPT1)免疫试剂盒进口、分装
山羊粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)免疫试剂盒*直销
兔子黏多糖/糖胺聚糖免疫试剂盒*直销
猪胱抑素C(CST3/Cys-C)免疫试剂盒*直销
绵羊饥饿激素(GHRL)免疫试剂盒*直销
大鼠肺炎病毒抗体(PV-Ab)免疫试剂盒进口、分装