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操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
商品属性：
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6324 |
商品介绍：
测定意义
NADK（EC 2.7.1.23）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)与NADP(H)的平衡上具有重要作用。
测定原理：
NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH；NADPH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT），通过在600 nm下测定MTT的还原速度（吸光值的变化）可反映出NADK活性的大小。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
实验方法学：
一、肝素的配制： 市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。 肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集： 全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
茜素绿 Dye content 95%(R)-1-Boc-3-羟基吡咯烷 98% Anti-Polyprotein (Hepatitis G Virus) 庚型肝炎病多聚蛋白抗体
灿烂绿 高纯级,95%2-(1-基)苯 97%Anti-ZEBRA 人类疱疹病4抗体
铋试剂Ⅰ 97%喹唑啉 98%Anti-membrane glycoprotein E(VZV) 人水痘带状疱疹病gE蛋白抗体
铋试剂II CP三氟磺酸钪 98%Anti-HHV8/ORF K2 类疱疹病8抗体
铋试剂II 98%四氢-2 2-二甲基-4H--4-酮 95%Anti-HHV8/ORF50 人类疱疹病8抗体
考马斯亮蓝G250 AR三(4-溴苯基) 98%Anti-HHV8/ORF50 人类疱疹病8抗体
考马斯亮蓝G250 AR，无蛋白2-甲酰基噻唑 97%Anti-HHV8/ORF50 人类疱疹病8抗体
考马斯亮蓝G250 70%，用于电泳500ml透气不透液垫片 40mm口径 配套42mm口径盖Anti-HHV8/ORF K2 人类疱疹病8抗体
NAD激酶（NADK）可见分光光度法检测试剂盒水质铜、铅、锌、镉、镍与铬混合标样 分析标准品 兔抗小鼠IgM
水质氟、、硫根与硝根混合标样 分析标准品兔抗小鼠k链
水质氟、与硫根混合标样 分析标准品兔抗长爪沙鼠IgG
浓度范围:0.125-2.22mg/L，分析标准品兔抗水貂IgG
标准溶液2.74-248mg/L,用于水质分析驴抗人IgG
浓度范围:19.6-247(mg/L),分析标准品驴抗兔IgG
水质、钠、钙与镁混合标样 分析标准品驴抗豚鼠IgG
硫化物标准溶液100mg/mL,体:0.6 mg/L,1.6 mg/L,0.8 mg/L鼠抗人IgG单克隆抗体
水质二氧化硫(法)（水剂）标样0.5 mg/L,0.6 mg/L,0.4 mg/LPE-Cy5.5标记的兔抗犬IgM抗体
三乙烯标准溶液 1000μg/ml，溶剂：PE-Cy7标记的兔抗犬IgM抗体
中1,2,4-三标样 分析标准品Alexa Fluor 350标记的兔抗犬IgM抗体
四乙烯标准溶液 1000μg/ml，溶剂：Alexa Fluor 488标记的兔抗犬IgM抗体
1,2,4-三标准溶液溶剂:,用于水分析Alexa Fluor 555标记的兔抗犬IgM抗体
1,2,3,4-四 分析标准品,98%Alexa Fluor 647标记的兔抗犬IgM抗体
中1,2,3,4-四标样 分析标准品辣根过氧化物标记的兔抗犬IgM抗体
