NADH氧化酶(NOX)可见分光光度法检测试剂
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2022-04-24 11:21:41
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产品简介

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详细介绍

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

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商品属性:

产品名称

NADH氧化酶(NOX)可见分光光度法检测试剂

规格

50管/48样

检测方法

可见分光光度法

货号

GOY-01S6334

商品介绍:

测定意义

NOX(EC 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将NADH氧化为NAD。该酶不仅参与NAD的再生,而且与免疫反应密切相关。

测定原理:

NOX能够将NADH氧化为NAD,NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP,在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

4-(Boc-)苯酸 97%2-甲基丁硫 95%Anti-phospho-RUNX1(Ser303)  化急性髓白血病1蛋白抗体

铍标准溶液 1000μg/ml2-甲基-2-噻唑啉 97%Anti-Runx3  Runx3抗体

2-溴-3-甲基吡-5-酸 95%4-甲基噻唑 99%Anti-S6PDH  6-山梨脱氢抗体

2-溴吡-5-酸频哪酯 98%甲基基二硫 97%Anti-S100B  S100B蛋白抗体

苯并呋喃-2-酸 98%烯基二硫 95%Anti-S100A1  S100A1抗体

2-氟-5-溴吡-3-酸 98% 2-吡基乙硫 98%Anti-S100A13  S100A13抗体

N-Boc-5-溴-2-酸 95%3-甲基-2-丁硫 98%Anti-SAMDC  S-腺苷蛋脱羧抗体

5-基-2-氟苯酸 97%烯基基三硫 50%Anti-S100-A8/MRP8  S100A8抗体

NADH氧化酶(NOX)可见分光光度法检测试剂碳化钨 粉末,99.9% metals basis, <10μmPE标记的兔抗小鼠k链

碳化钨 9.8%,3-20nm PE-CY5标记的兔抗小鼠k链

三氧化钨 SPAlexa Fluor 488标记的兔抗小鼠k链

三氧化钨 99.99% metals basisAlexa Fluor 647标记的兔抗小鼠k链

三氧化钨 比表面积15m2/g, 50nm,99.9%PE-Cy5.5标记的兔抗小鼠k链

三氧化钨 99.8% metals basisFITC标记的兔抗小鼠IgG-Fc

4-溴酰 96%辣根过氧化物标记的兔抗小鼠k链

对乙酮 97%PE-Cy3标记的兔抗猴IgM

AR,99.00%PE-CY5标记的兔抗猴IgM

CP,98.5%PE-Cy5.5标记的兔抗长爪沙鼠IgG

二乙二丁醋酯 98%PE-Cy3标记的兔抗长爪沙鼠IgG

二苄 98%PE-CY5标记的兔抗长爪沙鼠IgG

二乙二二乙 98%PE-Cy7标记的兔抗长爪沙鼠IgG

乙二二 standard for GC,≥99.5% (GC)Alexa Fluor 488标记的羊抗小鼠IgM

乙二二 AR,99.5%(GC)Alexa Fluor 555标记的羊抗小鼠IgM

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