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商品属性：
| 产品名称 | 辅酶ⅠNAD(H)含量可见分光光度法检测试剂盒 |
| 规格 | 50管/24样 |
| 检测方法 | 可见分光光度法 |
| 货号 | GOY-01S6322 |
商品介绍：
测定意义
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循环（TCA）的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链（ETC）传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外，NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
实验方法学：
一、肝素的配制： 市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。 肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集： 全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
果糖1,6二磷酸(FDP)测试盒 果糖1,6二磷酸(FDP)可见分光光度法检测试剂盒
3磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒 3磷酸甘油酸激酶(PGK)微量法检测试剂盒
3磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒 3磷酸甘油酸激酶(PGK)紫外分光光度法检测试剂盒
磷酸丙糖异构酶（TPI）测试盒 磷酸丙糖异构酶（TPI）微量法检测试剂盒
磷酸丙糖异构酶（TPI）测试盒 磷酸丙糖异构酶（TPI）紫外分光光度法检测试剂盒
果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)测试盒 果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)微量法检测试剂盒
果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)测试盒 果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)紫外分光光度法检测试剂盒
葡萄糖6磷酸(6PG)测试盒 葡萄糖6磷酸(6PG)微量法检测试剂盒
葡萄糖6磷酸(6PG)测试盒 葡萄糖6磷酸(6PG)可见分光光度法检测试剂盒
酸性蛋白酶测试盒 酸性蛋白酶微量法检测试剂盒
酸性蛋白酶测试盒 酸性蛋白酶可见分光光度法检测试剂盒
测试盒 微量法检测试剂盒
盒 见分光光度法检测试剂盒
氧化型/脱氢抗坏血酸（DHA）含量测试盒 氧化型/脱氢抗坏血酸（DHA）含量紫外分光光度法检测试剂盒
L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒 L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)微量法检测试剂盒
L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒 L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)可见分光光度法检测试剂盒
抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒 抗坏血酸氧化酶（AAO）微量法检测试剂盒
抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒 抗坏血酸氧化酶（AAO）紫外分光光度法检测试剂盒
抗坏血酸过氧化物酶（APX）测试盒 抗坏血酸过氧化物酶（APX）微量法检测试剂盒
嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Eosinophil Chemotactic Factor (ECF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
趋化因子C-C-基元配体3样蛋白1(CCL3L1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
趋化因子C-C-基元配体3样蛋白1(CCL3L1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
红细胞生成素受体(EPOR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Erythropoietin Receptor (EPOR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
红细胞生成素(EPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Erythropoietin (EPO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
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E选择素(SELE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
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凋亡相关因子(FAS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis (FAS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
凋亡相关因子(FAS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis (FAS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
凋亡相关因子配体(FASL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis Ligand (FASL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
凋亡相关因子配体(FASL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis Ligand (FASL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
酸性成纤维细胞生长因子(FGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
成纤维细胞生长因子4(FGF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
糖蛋白130(gp130)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucoprotein 130 (gp130) 48T/96T Homo sapiens (Human)
糖蛋白130(gp130)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucoprotein 130 (gp130) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
肝细胞生长因子(HGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
干扰素γ(IFNγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
辅肌动蛋白α2(ACTN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actinin Alpha 2 (ACTN2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
辅肌动蛋白α2(ACTN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actinin Alpha 2 (ACTN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
血小板激活因子(PAF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Platelet Activating Factor (PAF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
子Ⅵ(F6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor VI (F6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
纤维蛋白原(FG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen (FG) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
纤维蛋白原(FG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen (FG) 48T/96T Mus musculus (Mouse) (SST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin (SST) 48T/96T Homo sapiens (Human) SST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin (SST) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
辅酶ⅠNAD(H)含量可见分光光度法检测试剂盒SST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin (SST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
