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经销商厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
货号 | GOY-01S6926 |
商品介绍:
测定意义
CAD是木质素生物合成途径中的关键酶之一,是木质素单体合成反应中的最后一步,催化多种不同的肉桂醛(香豆醛、芥子醛以及松柏醛等)生成与之相应的肉桂醇。该酶多存在于高等植物、酵母、菌类中,研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理,为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。
测定原理:
CAD催化肉桂醇和NADP生成肉桂醛和NADPH,在340nm下测定NADPH生成速率,即可反映CAD活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
组织相容性复合体α抗体Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit相关抗体流式组化 XR0280R(抗大鼠)
肝生长因子激活抑制蛋白2抗体Human SEC61alpha ELISA Kitsrc原癌基因抗体流式组化
HOMER2抗体Human SDR42E1 ELISA KitL-天冬二甲酯盐酸盐
瘤病调控因子1抗体(锌指蛋白395)Human SDCCAG8 ELISA KitBOC-L-天冬
人类状瘤病18 E6单克隆抗体Human SCN4B ELISA Kit胰凝乳蛋白(牛)
异质核糖核蛋白F抗体Human SDCCAG10 ELISA Kit卵白素(鸡蛋)
异质核糖核蛋白K抗体Human SCNM1 ELISA Kit透明质酸钠
异质核糖核蛋白L抗体Human SCNN1A ELISA Kit钠
肉桂醇脱氢酶(CAD)紫外分光光度法大鼠血管舒缓激肽(BK)免疫试剂盒*直销
肝素辅因子II-凝血(HCII-T)复合物免疫试剂盒进口、组装
巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫试剂盒进口、分装
抗甲状腺过氧化物抗体(TPO-Ab)免疫试剂盒*直销
猪补体蛋白3(C3)免疫试剂盒现货供应
马铜锌超氧化物歧化(Cu/Zn-SOD/SOD1)免疫试剂盒现货供应
大鼠CC趋化因子受体9(CCR9)免疫试剂盒进口、分装
大鼠儿茶抑素免疫试剂盒现货供应
大鼠可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)免疫试剂盒进口、分装
鸡溶菌(LZM)免疫试剂盒现货供应
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。