胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法

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产品简介

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详细介绍

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法

100管/96样

微量法

GOY-01S6355

商品介绍

测定意义

ICDHcEC 1.1.1.42)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化异柠檬酸脱氢脱羧生成 α-酮戊二酸,同时还原NADP+生成NADPHICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源,在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。

测定原理:

利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应,在340 nm下测定NADPH浓度的增加。

所需的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

AR,99.0%β-萘酚 ARNrf2 peptide  核因子2相关因子2抗原

己二酸 超纯级,≥99.5% (HPLC)β-萘酚 分析标准品, ≥99.5%(GC)NRF-1(nuclear respiratory factor-1)  核呼吸因子-1抗原

 ACS, ≥99.0%β-萘酚 荧光指示剂, ≥99.0% (GCNSE (neuron specific enolase)  神经元特异性烯化抗原

AR,99.5% (剧品) Standard for GC,≥99.8% (GC)NTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide)  钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白抗原

光谱级,≥99.5%(GC)邻苯二 AR,98%Obestatin/Ghrelin/GHRP  肥胖抑制素抗原

 色谱级,≥99.8%(GC)3-二乙基 99%OCLN(Occluding)  咬合蛋白抗原

乙酸酐 AR,98.5%(易制品)N,N-二甲基正辛 95%Oct-4(Octamer-4)  胚胎干关键蛋白抗原

冰乙酸 AR,99.5%癸 98%ODC(Ornithine decarboxylase)  脱羧抗原

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法多效唑 分析标准品,>99%(HPLC)大象雌激素(E)免疫试剂盒三焦抗体GFP  绿色荧光蛋白抗体

多效唑标准溶液100μg/ml,u=2%,溶剂:植物ELISA试剂盒2,3-双加氧抗体GFP  绿色荧光蛋白(免疫组化用抗体)

多效唑标准溶液10μg/ml,u=2%,溶剂:植物蔗糖合成(SPS)免疫试剂盒白介素19抗体GFOD2  葡萄糖果糖还原2抗体

二戊乐灵 分析标准品,99%植物玉米素核苷(ZR)免疫试剂盒抑制素A/Inhibin α抗体GFI1B  独立生长因子1B抗体

二戊乐灵标准溶液100μg/ml,u=2%,溶剂:酮植物乙(IAA)免疫试剂盒胰岛素因增强结合蛋白1/2抗体GFAP delta  胶质纤维性蛋白GFAPδ抗体

二戊乐灵标准溶液10μg/ml,u=2%,溶剂:酮植物K1(VK1)免疫试剂盒化白介素-1受体相关激1抗体GFAP  胶质纤维性蛋白抗体

猛杀威 分析标准品,98.5%植物E(VE)免疫试剂盒化白介素-1受体相关激1抗体GERP/TRIM8/RNF27  环指蛋白27抗体

咪鲜 分析标准品,95.5%植物3(VD3)免疫试剂盒化白介素-1受体相关激1抗体Gephyrin  桥尾蛋白抗体

咪鲜标准溶液100μg/ml,u=2%,溶剂:植物2(VD2)免疫试剂盒干扰素调节因子3Gentamicin(3G7)  素单克隆抗体

咪鲜标准溶液10μg/ml,u=2%,溶剂:植物(VD)免疫试剂盒化干扰素调节因子3Gentamicin  素抗体

嘧霉 分析标准品,98.5%植物C(VC)免疫试剂盒干扰素调节因子7抗体Geminin  DNA复制抑制因子抗体

甜菜宁 分析标准品,99%植物B6(VB6)免疫试剂盒化干扰素调节因子7抗体Gelsolin  凝溶胶蛋白抗体

戊菌隆 分析标准品,99.5%植物B12(VB12)免疫试剂盒化胰岛素受体底物-1抗体GDPD5  甘油二酯结构域5抗体

嘧肟草 分析标准品,98%植物A(VA)免疫试剂盒化胰岛素受体底物-1抗体GDPD3  甘油二酯结构域3抗体

菊酯标准溶液 100μg/ml,u=4%,体:正己烷植物茄呢2,叶绿体(SPS2/SPPS)免疫试剂盒化胰岛素受体底物-1抗体GDPD2/GDE3  促进成骨分化因子抗体

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。


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