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测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6359 |
商品介绍
测定意义 ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。 测定原理: NAD-ME催化NAD+还原成NADH,在340nm下测定NADH增加速率。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
间粘附分子-2抗原Anti-GRM4 Antibody小鼠过氧化氢(CAT)elisa定量检测试剂盒
白介素1α/IL-1αAnti-GRK7 Antibody大鼠塔塔结合蛋白(TBP)elisa定量检测试剂盒
血蓝蛋白Anti-GRK6 Antibody大鼠TATA盒结合蛋白相关因子1(TAF1)elisa定量检测试剂盒
Ki-67Anti-GRM3 Antibody大鼠干因子受体(SCFR)elisa定量检测试剂盒
脂质运载蛋白Anti-GRM6 Antibody小鼠载脂蛋白A2(ApoA2)elisa定量检测试剂盒
瘦素Anti-GRM6 Antibody大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2SRβ)elisa定量检测试剂盒
偶联牛血清白蛋白Anti-GSC Antibody小鼠成纤维生长因子受体1(FGFR1)elisa定量检测试剂盒
与血蓝蛋白偶联物Anti-GSC2 Antibody小鼠锌结合α2-糖蛋白1(AZGP1)elisa定量检测试剂盒
NAD苹果酸酶(NADME)微量法检测试剂盒烯唑 分析标准品,99.5%大鼠C反应蛋白(CRP)免疫试剂盒HEATR4蛋白抗体Goat Anti-human IgM/Bio 标记的羊抗人IgM
标准溶液 100μg/ml,u=4%大鼠CXC趋化因子受体5(CXCR5)免疫试剂盒透明质及粘蛋白1抗体Goat Anti-human IgM/APC APC标记的羊抗人IgM
标准溶液 10μg/ml,u=6%(剧品)大鼠CXC趋化因子受体4(CXCR4)免疫试剂盒转录因子HES7抗体Goat Anti-human IgM/AP 碱性(AP)标记的羊抗人IgM
分析标准品,99%(剧品)大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)免疫试剂盒宫颈黏液蛋白相关蛋白抗体Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗人IgM
标准溶液 100μg/ml,u=3%大鼠c-ros致癌因1,受体酪氨激(ROS1)免疫试剂盒流感病H3N8血凝素抗体Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的羊抗人IgM
标准溶液 10μg/ml,u=6%大鼠Coronin-1A(Coro1a/Coro1)免疫试剂盒流感病H3N7血凝素抗体Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗人IgM
乙拌标准溶液 100μg/ml,u=3%大鼠c-jun 免疫试剂盒流感病H3N1血凝素抗体Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗人IgM
乙拌标准溶液 10μg/ml,u=7% (剧品)大鼠c-fos 免疫试剂盒同源盒蛋白HoxB3抗体Goat anti-human IgM whole serum 羊抗人IgM抗血清
溴菊酯 分析标准品,99.5%(剧品)大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-3脂酰转移,线粒体(PGS1)免疫试剂盒遗传性血色病蛋白相关蛋白1抗体Goat Anti-human IgM 羊抗人IgM
溴菊酯标准溶液 100μg/ml,u=3%大鼠CDCP1 免疫试剂盒甘油吸收/转运蛋白GUP1抗体Goat Anti-human IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗人IgG
溴菊酯标准溶液 10μg/ml,u=6% 大鼠CD8分子(CD8)免疫试剂盒HHIP蛋白抗体Goat Anti-human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗人IgG
吡氟酰草 分析标准品,99.5%大鼠CD68分子(CD68)免疫试剂盒亚铁氧化抗体Goat Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗人IgG
草萘 分析标准品,95%大鼠CD63分子(CD63)免疫试剂盒鸟苷释放因子p532蛋白抗体Goat Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗人IgG
除虫脲标准溶液 100μg/ml,u=2%大鼠CD4分子(CD4)免疫试剂盒HERC2 E3泛素蛋白连接抗体Goat Anti-human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗人IgG
除虫脲标准溶液 10μg/ml,u=3%大鼠CD45分子(CD45)免疫试剂盒HERC3 E3泛素蛋白连接抗体Goat Anti-human IgG/PE PE标记的羊抗人IgG