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选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
货号 | GOY-01S6364 |
商品介绍:
测定意义
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。
测定原理:
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、1mL石英比色皿和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
小鼠CD30分子Anti-NKx2.2 Antibody 人前胶原C端肽(PCP)elisa定量检测试剂盒
小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类Anti-NKX3-1 Antibody人B-Raf原癌基因/蛋白激(BRAF)elisa定量检测试剂盒
人巨噬移动抑制因子Anti-NKX2-8 Antibody人N-甲基-D-天氡离子能谷受体1(GRIN1)elisa定量检测试剂盒
大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体Anti-NKX6-3 Antibody人趋化因子(Lptn/XCL1)elisa定量检测试剂盒
人组织因子途径抑制物Anti-NLRX1 Antibody人乙酰辅A(A-CoA)elisa定量检测试剂盒
小鼠可溶性血管内皮蛋白C受体Anti-NKX6-3 Antibody人破骨相关受体(OSCAR)elisa定量检测试剂盒
大鼠碱性Anti-NLE1 Antibody人葡萄糖-6-脱氢(G6PD)elisa定量检测试剂盒
人干扰素诱导蛋白10Anti-NMBR Antibody人白介素7受体(IL7R)elisa定量检测试剂盒
肌酸激酶(CK)紫外分光光度法检测试剂盒2,8-双(三氟)-4-羟喹啉 99%Anti-GRM2+GRM4 促代谢型谷氨受体2+4抗体人角膜锁链蛋白(CDSN)联免疫吸附测定试剂盒
3-溴磺酰 98%Anti-GRO Alpha/GRO-1 生长调节致癌因-1抗体人接触蛋白1(CNTN1)联免疫吸附测定试剂盒
二乙膦酰乙叔丁酯 95%Anti-MIP2/GRO Beta/CXCL2 巨噬炎症蛋白2( GROβ)抗体人接触蛋白2(CNTN2)联免疫吸附测定试剂盒
2-溴-4-氟 98%Anti-GRO gamma/CXCL3 生长调节致癌因gamma(GROγ)抗体人接触蛋白3(CNTN3)联免疫吸附测定试剂盒
4-溴水杨 97%Anti-CXCL4/PF-4 血小板因子4抗体人接触蛋白4(CNTN4)联免疫吸附测定试剂盒
4-溴-2-(三氟) 97%Anti-CXCL5 上皮中性粒活化肽78抗体人接触蛋白相关蛋白1(CNTNAP1)联免疫吸附测定试剂盒
3-溴 98%Anti-GRP 促胃泌素释放肽抗体人接触蛋白相关蛋白样蛋白4(CNTNAP4)联免疫吸附测定试剂盒
5- 99%Anti-GRP78 葡萄糖调节蛋白78抗体(热休克蛋白70蛋白5)人接头蛋白2(ELMO2)联免疫吸附测定试剂盒
2-异烟 97%Anti-GRP94/gp96 葡萄糖调节蛋白94抗体人结蛋白(Des)联免疫吸附测定试剂盒
肉桂酰 97%Anti-GSK-3 alpha 葡萄糖合成激-3α抗体人结构特异性识别蛋白1(SSRP1)联免疫吸附测定试剂盒
3-肉桂 98%Anti-Phospho GSK3 alpha (Ser21) 化葡萄糖合成激3α抗体人结合珠蛋白(HP)联免疫吸附测定试剂盒
2-苄 99%Anti-Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641) 化葡萄糖合成1抗体人触珠蛋白相关蛋白(HPR)联免疫吸附测定试剂盒
2--5- 99%Anti-GSK-3 Beta (CT) GSK-3β抗体葡萄糖合成激-3β抗体人骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)联免疫吸附测定试剂盒
2--5- 97%Anti-GSK-3 Beta (CT) 葡萄糖合成激-3β抗体人转运蛋白2(TNPO2)联免疫吸附测定试剂盒
4- 98%Anti-phospho-GSK-3 Beta(Ser9) 化葡萄糖合成激3β抗体人线粒体解偶联蛋白2(UCP-2)联免疫吸附测定试剂盒