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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6600 |
商品介绍:
测定意义
苹果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是属于转移酶中酰基转移酶的一类,主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循环的关键酶之一,在MS催化下乙醛酸与乙酰反应生成苹果酸。
测定原理:
MS催化乙酰CoA和乙醛酸产生苹果酸,同时生成,使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在 412nm处有特征吸光值。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、和蒸馏水
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
纳米铝粉 99.9% metals basis:,粒径:50nm三(2-呋喃基)膦 99%GnRH ELISA Kit 大鼠促性腺释放
纳米铁粉 99.9%,50nm4-(三氟甲氧基)苯甲酸 97%LTB4 ELISA Kit 大鼠白三烯B4
纳米铁粉 99.9%,80nm3-(三氟甲基)苄 98%LIFR ELISA Kit 大鼠白血病抑制因子受体
纳米钼粉 比表面积3-8m2/g, 粒度80nm,99.9%4-(三氟甲基) 99%EGF ELISA Kit 大鼠因子
纳米镍粉 比表面积10m2/g-60m2/g, 粒度20nm-100nm,99.9%1-(3-三氟甲基)苯基哌 98%iFABP ELISA Kit 大鼠肠脂肪酸结合蛋白
银 99.5%,60-120nm4-(三氟甲基)苯酸 98%TE ELISA Kit 大鼠端粒
钨 比表面积10-15m2/g,粒度20nm-100nm,99.9%三(2-噻吩基)膦 98+%MMP-5 ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白5
4-叔丁基苯甲 97%四乙基四氟酸铵 99%MMP-4 ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白4
苹果酸合酶(MS)可见分光光度法检测试剂盒二烯新戊二酯 89%Anti-TGM3/FITC 荧光素标记转谷氨酰3抗体IgG猪硫皮肤素差向异构(DSE)联免疫吸附测定试剂盒
烯钠 99%Anti-Thioredoxin 1/FITC 荧光素标记硫氧还蛋白抗体IgG猪封闭蛋白1(CLDN1)联免疫吸附测定试剂盒
烯十八烷酯 96%Anti-Thymosin Alpha-1/FITC 荧光素标记 α-1抗体IgG猪核孔蛋白214kda(NUP214)联免疫吸附测定试剂盒
三乙二二烯酯 95%,stabilized with 60-100 ppm MEHQAnti-Tie1/FITC 荧光素标记血管生成素-1受体抗体IgG猪β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)联免疫吸附测定试剂盒
二烯四乙二酯 包含~0.006% 对二酚 稳定剂, 90%Anti-Tie2/FITC 荧光素标记上皮生长因子样域酪氨激2IgG猪泛素蛋白连接E3成分N-识别蛋白4 (UBR4)联免疫吸附测定试剂盒
三羟烷三烯酯 85%,含100ppm MEHQ稳定剂Anti-Phospho-Tie2 (Tyr992) /FITC 荧光素标记化血管生成素受体2抗体IgG猪组织蛋白L(CTSL)联免疫吸附测定试剂盒
烯四酯 98%,含500ppm单MEHQ稳定剂Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 荧光素标记化血管生成素受体2抗体IgG猪白介素3介导核因子(NFIL3)联免疫吸附测定试剂盒
烯三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 稳定剂,98%Anti-TIEG1/KLF10/FITC 荧光素标记TGF-β诱导早期应答因1抗体IgG猪胱天蛋白7(P7)联免疫吸附测定试剂盒
2,2,3,3-四氟烯酯 97%,含50ppm BHT稳定剂Anti-RALDH2/FITC 荧光素标记视黄脱氢2型抗体IgG猪胃泌素34(GT-34)联免疫吸附测定试剂盒
烯四酯 97%anti-RARRES1/TIG1/FITC 荧光素标记视黄受体应答蛋白1抗体IgG猪泛素蛋白(Ub)联免疫吸附测定试剂盒
二烯锌 95%Anti-TIGAR humen/FITC 荧光素标记兔抗人TIGAR蛋白抗体IgG猪丝氨蛋白(PRSS)联免疫吸附测定试剂盒
甘氨 AR,99.5-100.5%anti-Rarres2/TIG2/FITC 荧光素标记视黄受体应答蛋白2抗体IgG猪早期生长应答蛋白3(EGR3)联免疫吸附测定试剂盒
3--2- 99%Anti-Rarres3/TIG3/Chemerin/FITC 荧光素标记视黄受体应答蛋白3抗体IgG猪蛋白激Cα相互作用蛋白α1(PICK1)联免疫吸附测定试剂盒
6--2-硝 99%Anti-rInsulin /HRP 辣根过氧化物标记抗抗体IgG猪角蛋白20(CK20/KRT20)联免疫吸附测定试剂盒
4--2-硝 99%Anti-rInsulin /FITC 荧光素标记抗抗体IgG猪游离睾酮(F-TESTO)联免疫吸附测定试剂盒