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测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6365 |
商品介绍
测定意义 细胞内脂质的积累是脂质合成与分解失衡的结果。脂肪酸合成增多,而氧化分解降低,会导致细胞内脂质积累。FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰和丙二酰而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。 测定原理 以NADPH为还原力,FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成长链脂肪酸;通过测定NADPH的减少量,即可推算出FAS活性。 实验中所需仪器和用品 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
Saccharomyces cerevisiae脯羟化2检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae合成检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae43kDa Tar DNA结合蛋白检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae苄氯素1检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受体1检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受体2检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受体3检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受体1B检测试剂盒
脂肪酸合成酶(FAS)微量法检测试剂盒化镍 CP,98.0% Anti-PAX5 配对盒因5抗体小鼠凋亡蛋白激活因子(APAF1)联免疫吸附测定试剂盒
化镍 anhydrous, 99.99% metals basisAnti-PAX7 配对盒因7抗体小鼠水通道蛋白0(AQP-0)联免疫吸附测定试剂盒
肼 AR,98.0%Anti-PAX8 配对盒因8抗体小鼠二级淋巴组织趋化因子(SLC)联免疫吸附测定试剂盒
苦酮 ARAnti-PAX9 配对盒因9抗体小鼠水通道蛋白1(AQP-1)联免疫吸附测定试剂盒
CP,99.0%(剧品)Anti-PBK/TOPK PDZ连接激/T-LAK源蛋白激抗体小鼠生长调节致癌因γ(GROγ)联免疫吸附测定试剂盒
GR,99.8%Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) 化PDZ连接激/T-LAK源蛋白激抗体小鼠水通道蛋白2(AQP-2)联免疫吸附测定试剂盒
99.995%Anti-Paxillin 桩蛋白Paxillin抗体小鼠晚期糖化终末产物受体(AGER)联免疫吸附测定试剂盒
玫瑰红 IndicatorAnti-Phospho-Paxillin (Tyr118) 化桩蛋白Paxillin抗体小鼠水通道蛋白3(AQP-3)联免疫吸附测定试剂盒
过氧化钠 95%Anti-P-cadherin P-钙粘附分子抗体小鼠水通道蛋白4(AQP-4)联免疫吸附测定试剂盒
高钠 ACS, 99.8-100.3% Anti-R-cadherin R-钙粘附分子抗体小鼠精氨(Arg)联免疫吸附测定试剂盒
亚硝钴钠 AR,Co 13.5~14.5%Anti-LI-cadherin 肝肠钙粘连蛋白抗体小鼠精氨受体1A(AVPR1A)联免疫吸附测定试剂盒
偏铝钠 ARAnti-PCNA 增殖核抗原抗体小鼠芳香烃受体(AhR)联免疫吸附测定试剂盒
烧碱石棉 CP,20-30目Anti-PCNA 增殖核抗原抗体小鼠芳香烃受体相互作用蛋白(AIP)联免疫吸附测定试剂盒
氢钠 AR(剧品)ANti-PDCD4 凋亡相关蛋白4抗体小鼠芳香烃受体核转位蛋白2(ARNT2)联免疫吸附测定试剂盒
亚硝钴钠 99.995% metals basisAnti-PCNA-Proliferation Marker 增殖核抗原抗体小鼠无唾液糖蛋白受体(ASGR1)联免疫吸附测定试剂盒x