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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6601 |
商品介绍
测定意义 HK(EC 2.7.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶,催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。 测定原理 HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰。 需自备的仪器和用品 紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
四丁基氢氧化铵 ~40% 水溶液,离子色谱级2-氯-1,3-二甲基氯化咪唑鎓 90%Anti-CD56/NCAM1 神经粘附分子1抗体
2,4,5-三氯 分析标准品氯代二碳鎓六氟盐 98%Anti-CD171/NCAM-L1 神经粘附分子配体1抗体
甲基叔戊基 97%氯代三吡咯烷基鏻六氟盐 98%Anti-CD172a/SIRP Alpha 信号调节蛋白α抗体
DL-α-酚琥珀酸酯 分析标准品多肽试剂TCTU 98%Anti-CD57 CD57抗体
基氧鎓四氟酸盐 96%2-氯-1,3-二甲基咪唑六氟盐 98%Anti-CD68 CD68抗体
(基硅烷基)重氮 2.0M 己烷溶液3-(二乙氧基磷酰氧基)-1,2,3-苯并三-4-酮 98% Anti-CD68 CD68抗体
三(2-乙基) 97%代二乙酯 纯度 ≥90%Anti-CD69/CLEC2C/AIM 活化诱导分子CD69抗体
2-硫脲嘧 分析标准品2-(2-吡酮-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟酸盐 99%Anti-CD72/Ly-32 CD72蛋白抗体
己糖激酶(HK)微量法检测试剂盒二溴 99%大鼠抗抗体(AsAb)免疫试剂盒转录因子Gli3抗体HSD17B1 羟类固脱氢17β-HSD抗体
溴烷 >99.0%(GC)大鼠抗状腺素(T4)抗体(IgG)免疫试剂盒GLIS2蛋白抗体HSD11B2 羟类固脱氢11β2抗体
硫镍铵,六水 CP,98.0%大鼠抗状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)免疫试剂盒鸟苷环化激活蛋白1抗体HSD11B1/HSD1 羟类固脱氢11β1抗体
酰 CP大鼠抗状腺过氧化物抗体(TPO-Ab)免疫试剂盒GSK3B相互作用蛋白抗体HRPT2/CDC73/Parafibromin 状旁腺功能亢进蛋白2抗体(分裂周期73)
酰 99%大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)免疫试剂盒高尔体膜相关蛋白6抗体HRP2 肝癌衍生生长因子2抗体
酰 99.5%,升华纯化大鼠抗环胍氨肽抗体(Anti-CCP-antibody)免疫试剂盒高尔体自身蛋白GM130抗体Hrk/BCL2 interacting protein BCL2相互作用蛋白质抗体
硫联氨 CP,98.0%大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)免疫试剂盒糖代谢相关蛋白1抗体HRH4/GPCR105 组织H4受体抗体
拧盖机 SG-1550型手持式大鼠抗弓形虫IgM抗体免疫试剂盒G蛋白偶联受体64抗体HRH3/GPCR97 组织H3受体抗体
钢板铡刀大鼠抗弓形虫IgG抗体免疫试剂盒γ氨丁受体相关蛋白样1抗体HRH2 组受体H2抗体
移动白板架 240*120加厚型单面磁性白板配加厚型双杠大鼠抗单核抗体(AMA)免疫试剂盒法尼二合1抗体HRH1 组受体H1抗体
(+)-樟脑 99%大鼠抗促状腺素受体抗体(TRAb)免疫试剂盒核苷结合蛋白1抗体HRG-alpha/Neuregulin 1 Heregulin α蛋白抗体
双(4-)酯 99%大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫试剂盒胶质纤维性蛋白GFAPδ抗体HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗体
1,2,4-三氮唑-3-羧酯 99%大鼠抗IVIgG抗体免疫试剂盒β半糖苷抗体Hrasls3/HREV107 HRAS样抑制因子3抗体
2,2-双(羟) 98%大鼠抗IgE受体抗体免疫试剂盒巨轴索蛋白GAN抗体HRASLS2 HRAS样抑制因子2抗体
2,2-二羟丁 98%大鼠巨噬移动抑制因子(MIF)免疫试剂盒G蛋白偶联受体结合蛋白O亚A2抗体HRAS+KRAS 转化蛋白p21抗体(原癌因H-ras抗体)
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。