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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6936 |
商品介绍:
测定意义
生物碱存在于自然界(主要为植物,但有的也存在于动物)中的一类含氮的碱性有机化合物,大多数有复杂的环状结构,氮素多包含在环内,有显著的生物活性,是中草药中重要的有效成分之一。
测定原理:
生物碱与溴甲酚绿指示剂反应,生成绿色化合物,在416nm处有最大吸收峰。
需自备的仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、80%乙醇、和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
聚(甲基氢硅氧烷) 粘度:15 - 40 mPa.s (20°C)氧化镨 50nm 球形,99.5%Anti-MARCKS /FITC 荧光素标记蛋白激C底物Marcks抗体IgG
红色氧化铅 AR,95%氧化镨 99.999% metals basisAnti-MAP1A/Mtap1a /FITC 荧光素标记微管相关蛋白1A抗体IgG
黄色氧化铅 AR,99.0%硝酸镨 99% Anti-MAP1LC3A/FITC 荧光素标记自噬微管相关蛋白轻链3抗体IgG
黄色氧化铅 99.999% metals basis硝酸镨 99.9% metals basisAnti-MAP-2/FITC 荧光素标记微管相关蛋白2抗体IgG
黄色氧化铅 ACS, 99.0%硝酸镨 99.99% metals basisAnti-Phospho-MAP2 (Ser136) /FITC 荧光素标记化微管相关蛋白2抗体IgG
黄色氧化铅 99.9% metals basis金属镨 99%,粒状Anti-Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) /FITC 荧光素标记化微管相关蛋白2抗体IgG
黄色氧化铅 99.99% metals basis金属镨 粉末,99.9% metals basisAnti-ERK1/MAPK3/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激3抗体IgG
巴豆酸 98%金属镨 锭, 存放于油中,99.9% metals basisAnti-MAPK4/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激4抗体IgG
生物碱含量可见分光光度法检测试剂盒白介素2(IL-2)抗体免疫试剂盒现货供应
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突触泡蛋白(SYP)免疫试剂盒现货供应
小鼠载脂蛋白B48(apo-B48)免疫试剂盒*直销
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大鼠内皮素受体A(ETR-A)免疫试剂盒现货供应
牛成纤维细胞生长因子21(FGF21)免疫试剂盒*直销
犬转移生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒进口、分装
鸡神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫试剂盒*直销