蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法检测试剂盒

蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法检测试剂盒

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2022-04-24 12:24:32
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产品简介

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详细介绍

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商品属性:

产品名称

蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法检测试剂盒

规格

50管/48样

检测方法

紫外分光光度法

货号

GOY-01S6368

商品介绍:

测定意义

SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷键,催化葡萄糖基转移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相应的葡萄糖基低聚糖。此外,SP还能催化合成熊果苷,具有的美白效果,在化妆品工业中具有重要应用。

测定原理:

SP能够以磷酸为受体,催化蔗糖产生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸变位酶催化下变位为6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下还原NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。测定340nm吸光度增加速率,即可计算SP活性。

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、1mL石英比色皿和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

二氧化硅 99.5%,15±5nm2-环己基溴乙烷 98%human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit  人甲状腺激球蛋白

氧化锶 AR4-溴苄氯 98%human Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit  人甲状旁腺

氧化锶 97%,5-8um(S)-(-)-1-(4-溴苯)乙 99%, ee 98%human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT  人甲肟前列腺素D2

 99.8%,60nm,锐钛,亲水1-溴-2-氟苯 98%human Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit  人高敏甲状腺素

 99.8%,40nm,锐钛,亲水4-溴-2-氟苯甲 97%human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit  人高灵敏度促甲状腺

纳米 99.8%,40nm,金虹,亲水1-溴-2-萘酚 98%human dopamine,DA ELISA KIT  人多巴

纳米 99.8%,60nm,金虹3-溴喹啉 98%human Azidothymidine,AZT ELISA Kit  人苷

纳米 99.8%,5-10nm,锐钛,亲水亲油型1-溴-4-氯-2- 99%human adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit  人促皮质

蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法检测试剂盒邻二酰亚 99%人类泛素蛋白ISG15 免疫试剂盒整合素αM/巨噬表面分子抗体phospho-P53(Ser392)  化肿瘤抑制因P53抗体

2-乙-3-吡 99%人类白抗原G(HLA-G)免疫试剂盒血小板内皮黏附分子-1抗体phospho-P53(Ser376)  化肿瘤抑制因P53抗体

2-乙-3-吡 ≥98%, FCC, Kosher, FG人类白抗原E(HLA-E)免疫试剂盒血小板内皮黏附分子1抗体phospho-P53(Ser37)  化肿瘤抑制因P53抗体

18-冠-6 99%人类白抗原B27(HLA-B27)免疫试剂盒CD34抗体phospho-P53(Ser33)  化肿瘤抑制因P53抗体

, 含稳定剂铜屑, 98%人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)免疫试剂盒CD36抗体phospho-P53(Ser315)  化肿瘤抑制因P53抗体

代异戊烷 97%人酪氨酰tRNA合成(YARS)免疫试剂盒凋亡加强结构域蛋白6抗体phospho-P53(Ser20)  化肿瘤抑制因P53抗体

乙烷 99%,含铜屑稳定剂人酪氨酰DNA 二酯1(TDP1)免疫试剂盒凋亡加强结构域蛋白17抗体phospho-P53(Ser15)  化肿瘤抑制因P53抗体

1-戊烷 98%,含稳定剂铜屑人酪氨羟化(TH)免疫试剂盒凋亡加强结构域蛋白4抗体Phospho-p40phox (Thr154)  化嗜中性粒胞浆因子4抗体

AR,99.5%人酪氨激2(Tyk-2)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框34抗体phospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182)  化丝裂原活化蛋白激p38抗体

代正丁烷 98%人酪氨蛋白激受体TYRO3(TYRO3)免疫试剂盒酪蛋白激1γ3/CKI γ3抗体phospho-p23 (Ser113)  化端粒结合蛋白P23抗体

1-烷 99%人兰尼碱受体2(RYR2)免疫试剂盒凋亡加强结构域蛋白9抗体phospho-p107/RBL1(Ser975)  化视网膜母瘤样蛋白p107抗体

 CP,95.0%(剧品)人兰尼碱抗体免疫试剂盒胆固氧化抗体phospho-p107(Thr369)   化视网膜母瘤样蛋白p107抗体

 AR,98.0%(剧品)人赖氨酰氧化免疫试剂盒半胱蛋白蛋白14抗体phospho-ODF2(Ser796)  化尾部结构蛋白抗体

三溴化 CP,98.0% 人赖氨特异性脱5A(JARID1A)免疫试剂盒半胱蛋白蛋白5抗体Phospho-Nur77(Ser351)  化孤儿核受体蛋白Nur77抗体

97%人醌NADH脱氢1(NQO1)免疫试剂盒猪瘟病抗体Phospho-Numb (Ser276)  化膜相关蛋白Numb抗体

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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