己糖激酶(HK)紫外分光光度法检测试剂盒

己糖激酶(HK)紫外分光光度法检测试剂盒

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2022-04-27 10:24:49
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产品简介

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详细介绍

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商品属性:

产品名称

己糖激酶(HK)紫外分光光度法检测试剂盒

规格

50管/48样

检测方法

紫外分光光度法

货号

GOY-01S6602

商品介绍:

测定意义

HK(EC 2.7.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶,催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。

测定原理

HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

人促有丝分裂因子Bacillus subtilis subsp. subtilis整合素αVβ3检测试剂盒

人转录因子抗体-1Bacillus subtilis subsp. subtilis整合素结合唾液蛋白检测试剂盒

人抗鼠抗体Bacillus subtilis subsp. subtilis正常T表达和分泌因子检测试剂盒

人钙离子通道抗体Bacillus subtilis subsp. subtilis脂阿拉伯甘露聚糖检测试剂盒

人溴脱氧核苷尿嘧Bacillus subtilis subsp. subtilis脂蛋白α检测试剂盒

人纤维母表面抗原Bacillus subtilis subsp. subtilis脂蛋白磷脂A2检测试剂盒

人分泌性白蛋白抑制因子Bacillus subtilis subsp. subtilis脂蛋白脂检测试剂盒

人阿黑皮素原Bacillus subtilis subsp. subtilis脂多糖;内素检测试剂盒

己糖激酶(HK)紫外分光光度法检测试剂盒氢二,三水 99.99% metals basisP抗体AQP2  水通道蛋白-2抗体

二氢 for cell culture, for insect cell culture,≥99%丝氨/苏氨激蛋白PIM1+PIM3抗体AQP1/CHIP  水通道蛋白1抗体

二氢 for plant cell culture, ≥99%胞浆蛋白PACSIN3抗体AQP0/MIP26  水通道蛋白0抗体

二氢 for molecular biology, ≥99%跨膜接头蛋白PAG抗体AP-TNAP/ALPL  碱性抗体

二氢 for HPLC,≥99.5% (T)PARD6G蛋白抗体APS  APS抗体

三聚钠 AR,98%胎盘蛋白6抗体APRIN/PDS5B  雄激素诱导增殖抑制蛋白抗体

三聚钠 CP,97%肌3激接头蛋白1抗体APR3/C2orf28  凋亡相关蛋白3抗体

二氢钠 ARPRAM1蛋白抗体APPL1  衔接因子蛋白含pH域酪氨结合域和亮氨拉链蛋白1抗体

二氢钠 CP广谱角蛋白PCK抗体APPD/LAPF  凋亡诱导蛋白D抗体

二氢钠 用于分子生物学, ≥99.0% (T)Rho鸟甘转运蛋白抗体APP695 (CT)  淀粉样肽前体蛋白抗体(C端)

二氢钠 ACS化脂酰肌激抗体APP/ABPP  淀粉样肽前体蛋白抗体

无水二氢钠 AR,99.0%  化帕金蛋白抗体APP/ABPP  APP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体

无水二氢钠 CP,98.0%化帕金蛋白抗体Apoptosis enhancing nuclease  凋亡增强核抗体

无水二氢钠 99.999% metals basis化血小板源性生长因子受体B抗体Apollon/BIRC6  Apollon凋亡抑制蛋白抗体

无水二氢钠 用于分子生物学, ≥99%化血小板源性生长因子受体B抗体APOL6  载脂蛋白样蛋白6抗体

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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