丙酮酸激酶(PK)微量法检测试剂盒

丙酮酸激酶(PK)微量法检测试剂盒

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2022-04-27 10:26:15
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产品简介

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详细介绍

商品介绍

测定意义

PKEC 2.7.1.40)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化糖酵解过程中的最后一步反应,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,也是产生ATP的关键酶之一,因此测定PK活性具有重要意义。

测定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PK活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

丙酮酸激酶(PK)微量法检测试剂盒

100管/96样

微量法

GOY-01S6603


QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

转录因子LBX1抗体Human ICTP(Cross-linked C-terminal opeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit四正丁基化铵

神经特异性转录因子LDB1抗体Human PCDH11Y ELISA Kit醋酸辛酯

白化学吸引素2抗体Human PCDH11X ELISA Kit芥子碱盐

LHX5蛋白抗体Human PCDHA3 ELISA Kit白头翁皂苷 B4

单蛋白激1+2抗体Human PCDHA2 ELISA Kit灰毡毛忍冬皂苷乙

LIN7C蛋白抗体Human PCDH9 ELISA Kit人参

富含亮重复序列Nogo受体反应蛋白4抗体Human PCDHGB3 ELISA Kit杜仲

富含亮α2糖蛋白抗体Human PBRM1 ELISA KitD-

丙酮酸激酶(PK)微量法检测试剂盒化钴,六水 ARIGF-1 R   人胰岛素样生长因子-I受体猴脂蛋白脂(LPL)联免疫吸附测定试剂盒

正丁锆 80 wt. %正丁溶液IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5)  胰岛素样生长因子结合蛋白-5(抗原)猴上皮中性粒活化肽78(ENA-78)联免疫吸附测定试剂盒

 CP,98.5%Isulin  胰岛素(抗原)猴c-jun联免疫吸附测定试剂盒

黄蓍树胶粉 USP级APC(Activated protein C)  APC活化蛋白C抗原猴免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)联免疫吸附测定试剂盒

5-氟尿嘧 99%Apelin  脂肪炎症因子Apelin抗原猴转录激活因子-2(ATF-2)联免疫吸附测定试剂盒

6-尿嘧 ≥98%Apelin receptor/APJ receptor   Apelin receptor抗原猴内皮型一氧化氮合(NOS3/eNOS)联免疫吸附测定试剂盒

2-(4-羟)乙 98%APG4B/AUTL1  APG4B自噬相关抗原猴髓鞘相关糖蛋白(MAG)联免疫吸附测定试剂盒  

2-戊烷 82%apoA1 (Apolipoprotein/APOA1 protein )human  载脂蛋白A1抗原猴烟酰腺嘌呤二核苷(NADPH)联免疫吸附测定试剂盒

2,2'-联吡 AR,99.0%Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J)  凝聚素α/β抗原猴Ras-GTP激活蛋白1(Ras-GAP1)联免疫吸附测定试剂盒

腺嘌呤核苷  分析标准品Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha)  胰岛素受体-α(抗原)猴骺蛋白聚糖(EPYC)联免疫吸附测定试剂盒  

连翘苷  分析标准品,>97%Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha)  胰岛素受体-α(抗原)猴胸苷合成(TS/TYMS)联免疫吸附测定试剂盒

连翘 分析标准品,>96.00% (HPLCInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta)  胰岛素受体-β(抗原)猴去唾液糖蛋白受体2(ASGR2)联免疫吸附测定试剂盒

藤黄 97% (HPLC)IRS-1  胰岛素受体底物-1(抗原)猴抑制蛋白β1(ARRβ1)联免疫吸附测定试剂盒

连翘脂素 分析标准品,>98%AQP3(aquaporin 3)  水通道蛋白-3抗原猴白介素17(IL-17)联免疫吸附测定试剂盒

原人参二 分析标准品,≥98%IRS-2   胰岛素受体底物-2(抗原)猴胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)联免疫吸附测定试剂盒


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