丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法检测试剂盒

丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法检测试剂盒

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2022-04-27 10:27:32
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产品简介

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石蜡

详细介绍

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法检测试剂盒

50管/48样

紫外分光光度法

GOY-01S6604

商品介绍

测定意义

PKEC 2.7.1.40)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化糖酵解过程中的最后一步反应,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,也是产生ATP的关键酶之一,因此测定PK活性具有重要意义。

测定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PK活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

氟酸锌 CPp, p’-DDD标准溶液100μg/ml,u=2%,溶剂:石油Anti-BRAF/FITC  荧光素标记黑素瘤相关蛋白抗体IgG

硝酸锌,六水 AR,99%p, p’-DDD标准溶液10μg/ml,u=7%,溶剂:石油Anti-B Raf(phospho S365) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化B-Raf抗体IgG

硝酸锌,六水 CP,98%o,p’-DDT标准溶液100μg/ml,溶剂:甲Anti-phospho-B-Raf (Ser445)/FITC  荧光素标记化B-Raf抗体IgG

硝酸锌,六水 99.99% metals basiso,p’-DDT标准溶液 100μg/ml,u=2%Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC  荧光素标记化B-Raf抗体IgG

氧化锌 99.999% metals basiso,p’-DDT标准溶液 10μg/ml,u=4%Anti-BRCA1(human)/FITC  荧光素标记癌易感基因1抗体(人)IgG

氧化锌 药典级(Ph. Eur., BP, USP, 99-100.5%)乙苯标准溶液1000ppm,基质:甲Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC  荧光素标记癌易感基因1抗体(小鼠 大鼠)IgG

,七水 AR,99.5%异标准溶液 100μg/ml,溶剂:甲(剧品)Anti-BRCA1(Phospho Ser1524) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化癌易感基因1抗体IgG

,七水  99.995% metals basis乙苯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:二硫化碳Anti-BRCA2/FITC  荧光素标记癌易感基因2抗体IgG

丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法检测试剂盒Anti-S6PDH/FITC  荧光素标记抗6-山梨脱氢抗体IgG绵羊接触蛋白4(CNTN4)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SAMDC/AMD1/FITC  荧光素标记S-腺苷蛋氨脱羧抗体IgG绵羊(LZM)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SARS S-protein/FITC  荧光素标记非典病表面蛋白S抗体IgG绵羊衰老关键蛋白5(FBLN5)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC  荧光素标记SARS抗体IgG绵羊白分化抗原CD4(CD4)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SATB1/FITC  荧光素标记核质结合区结合蛋白1抗体IgG绵羊抗白蛋白抗体(AAA)联免疫吸附测定试剂盒  

Anti-Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC  荧光素标记化核质结合区结合蛋白1抗体IgG绵羊平滑肌肌动蛋白α2(ACTα2)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SCF/FITC  荧光素标记干生长因子抗体IgG绵羊间羟素(MN)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SCG3/SgIII /FITC  荧光素标记分泌粒蛋白Ⅲ抗体IgG绵羊表睾酮(ET)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SCN1A/FITC  荧光素标记电压阀门钠通道蛋白a1/癫痫相关蛋白抗体IgG绵羊生长分化因子11(GDF11)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SCN2A/FITC  荧光素标记电压阀门钠通道蛋白a2/癫痫相关蛋白抗体IgG绵羊糖皮质激素受体α(GRα)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SCN9A/NAV1.7/FITC  荧光素标记电压开启的钠离子通道SCN9AIgG绵羊纤溶原激活物抑制因子1(PAI1)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SCP2/NLTP/FITC  荧光素标记固携带蛋白2抗体IgG绵羊多巴受体D4(D4R/DRD4)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-SCP3/FITC  荧光素标记联会复合体蛋白3抗体IgG绵羊染色盒同源物3(CBX3)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Secretin/FITC  荧光素标记分泌素抗体IgG绵羊半糖苷β(GLβ)联免疫吸附测定试剂盒

Anti-Secretin receptor/FITC  荧光素标记分泌素受体抗体IgG绵羊Toll样受体9(TLR9/CD289)联免疫吸附测定试剂盒

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

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