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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
50管/48样 | 紫外分光光度法 | GOY-01S6604 |
商品介绍
测定意义 PK(EC 2.7.1.40)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化糖酵解过程中的最后一步反应,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,也是产生ATP的关键酶之一,因此测定PK活性具有重要意义。 测定原理 PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PK活性。 需自备的仪器和用品 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
氟酸锌 CPp, p’-DDD标准溶液100μg/ml,u=2%,溶剂:石油Anti-BRAF/FITC 荧光素标记黑素瘤相关蛋白抗体IgG
硝酸锌,六水 AR,99%p, p’-DDD标准溶液10μg/ml,u=7%,溶剂:石油Anti-B Raf(phospho S365) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化B-Raf抗体IgG
硝酸锌,六水 CP,98%o,p’-DDT标准溶液100μg/ml,溶剂:甲Anti-phospho-B-Raf (Ser445)/FITC 荧光素标记化B-Raf抗体IgG
硝酸锌,六水 99.99% metals basiso,p’-DDT标准溶液 100μg/ml,u=2%Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC 荧光素标记化B-Raf抗体IgG
氧化锌 99.999% metals basiso,p’-DDT标准溶液 10μg/ml,u=4%Anti-BRCA1(human)/FITC 荧光素标记癌易感基因1抗体(人)IgG
氧化锌 药典级(Ph. Eur., BP, USP, 99-100.5%)乙苯标准溶液1000ppm,基质:甲Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC 荧光素标记癌易感基因1抗体(小鼠 大鼠)IgG
锌,七水 AR,99.5%异标准溶液 100μg/ml,溶剂:甲(剧品)Anti-BRCA1(Phospho Ser1524) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化癌易感基因1抗体IgG
锌,七水 99.995% metals basis乙苯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:二硫化碳Anti-BRCA2/FITC 荧光素标记癌易感基因2抗体IgG
丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法检测试剂盒Anti-S6PDH/FITC 荧光素标记抗6-山梨脱氢抗体IgG绵羊接触蛋白4(CNTN4)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SAMDC/AMD1/FITC 荧光素标记S-腺苷蛋氨脱羧抗体IgG绵羊(LZM)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SARS S-protein/FITC 荧光素标记非典病表面蛋白S抗体IgG绵羊衰老关键蛋白5(FBLN5)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC 荧光素标记SARS抗体IgG绵羊白分化抗原CD4(CD4)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SATB1/FITC 荧光素标记核质结合区结合蛋白1抗体IgG绵羊抗白蛋白抗体(AAA)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC 荧光素标记化核质结合区结合蛋白1抗体IgG绵羊平滑肌肌动蛋白α2(ACTα2)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SCF/FITC 荧光素标记干生长因子抗体IgG绵羊间羟素(MN)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SCG3/SgIII /FITC 荧光素标记分泌粒蛋白Ⅲ抗体IgG绵羊表睾酮(ET)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SCN1A/FITC 荧光素标记电压阀门钠通道蛋白a1/癫痫相关蛋白抗体IgG绵羊生长分化因子11(GDF11)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SCN2A/FITC 荧光素标记电压阀门钠通道蛋白a2/癫痫相关蛋白抗体IgG绵羊糖皮质激素受体α(GRα)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SCN9A/NAV1.7/FITC 荧光素标记电压开启的钠离子通道SCN9AIgG绵羊纤溶原激活物抑制因子1(PAI1)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SCP2/NLTP/FITC 荧光素标记固携带蛋白2抗体IgG绵羊多巴受体D4(D4R/DRD4)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SCP3/FITC 荧光素标记联会复合体蛋白3抗体IgG绵羊染色盒同源物3(CBX3)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Secretin/FITC 荧光素标记分泌素抗体IgG绵羊半糖苷β(GLβ)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Secretin receptor/FITC 荧光素标记分泌素受体抗体IgG绵羊Toll样受体9(TLR9/CD289)联免疫吸附测定试剂盒
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。