磷酸丙糖异构酶(TPI)紫外分光光度法

磷酸丙糖异构酶(TPI)紫外分光光度法

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2022-04-27 10:34:02
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产品简介

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详细介绍

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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商品属性:

产品名称

磷酸丙糖异构酶(TPI)紫外分光光度法检测试剂盒

规格

50管/48样

检测方法

紫外分光光度法

货号

GOY-01S6618

商品介绍:

测定意义

磷酸丙糖异构酶是重要的糖酵解酶,广泛存在于动植物及微生物体内,在机体内参与葡萄糖代谢,在糖酵解,糖异生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代谢中都发挥着重要作用。

测定原理

磷酸丙糖异构酶将磷酸二羟丙酮转化为3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛与NAD在3-磷酸甘油醛脱氢酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH,340nm处的吸光度变化反映了磷酸丙糖异构酶的活性的高低。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

三异基亚酯 90%4-正基乙炔 98%Anti-VAMP-1/Synaptobrevin-1  VAMP1囊泡相关膜蛋白1抗体

三异基亚酯 95%4-正戊基苯酸 97%Anti-VAMP-2  囊泡相关膜蛋白2抗体

硅酸 AR1-溴-4-戊苯 97%Anti-VAMP-3  囊泡相关膜蛋白3抗体

硅酸 99.9% metals basis4-甲基联苯 98%Anti-VAP1  血管粘附蛋白1抗体

薄层层析硅胶板 50×200mm GF254型号 20片/盒4-正戊基联苯 99%anti-VASH1  血管抑制蛋白1抗体

薄层层析硅胶 H604-正基环己酮 99%Anti-VHL/HRCA1  VHL肿瘤抑制因子抗体

薄层层析硅胶 GF254 604-基-4'-戊基联苯 98%Anti-VASP  血管扩张激磷蛋白抗体

薄层层析硅胶 HF254 604-基-4'-戊氧基联苯 98%Anti-Phospho-VASP (Ser157)  化血管扩张激磷蛋白抗体

磷酸丙糖异构酶(TPI)紫外分光光度法检测试剂盒荭草苷 分析标准品,≥99%Anti-EDNR-A/FITC  荧光素标记抗内皮素受体A抗体IgG大鼠蛋白激Bγ(PKBG)联免疫吸附测定试剂盒

千层纸素A  分析标准品,≥98%Anti-EF1a/FITC  荧光素标记延伸因子EF-1a抗体IgG大鼠蛋白激B(PKB)联免疫吸附测定试剂盒

紫草素  分析标准品,≥97%Anti-EEF2/FITC  荧光素标记真核翻译延长因子2抗体IgG大鼠蛋白激Cβ1(PKCB1)联免疫吸附测定试剂盒

毛蕊花糖苷 分析标准品Anti-EEF2k/FITC  荧光素标记真核延伸因子激2抗体IgG大鼠蛋白激Cδ(PKCD)联免疫吸附测定试剂盒

汉黄芩甙 分析标准品,≥98%Anti-EGF/FITC  荧光素标记因子抗体IgG大鼠蛋白激C-ε(PKCe)联免疫吸附测定试剂盒

花椒酚 分析标准品,≥98%Anti-EGF-R/FITC  荧光素标记因子受体抗体IgG大鼠蛋白激C-γ(PKCg)联免疫吸附测定试剂盒

9-蒽 99%Anti-EGFR/FITC  荧光素标记因子受体抗体IgG大鼠蛋白激C-ο(PKCi)联免疫吸附测定试剂盒

9-蒽 98%Anti-EGFRvIII/FITC  荧光素标记因子受体III型突变体抗体IgG大鼠蛋白激C-θ(PKCq)联免疫吸附测定试剂盒

9-蒽 98%Anti-EGFR/PE  荧光素PE标记因子受体抗体IgG大鼠蛋白激C-ζ(PKCz)联免疫吸附测定试剂盒

AR,98%Anti-EGFR /Gold  金标记因子受体抗体IgG大鼠蛋白激C(PKC)联免疫吸附测定试剂盒

GR,99%Anti-Phospho-EGFR(Ser1046/1047) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化因子受体抗体IgG大鼠蛋白激1(PK D1)联免疫吸附测定试剂盒

9-芴 99% Anti-Phospho-EGFR(Thr669) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化因子受体抗体IgG大鼠蛋白激2(PK D2)联免疫吸附测定试剂盒

9-芴酮 99%Anti-Egr-1/FITC  荧光素标记早期反应因-1/应急反应生长因1抗体IgG大鼠蛋白激抑制剂α(PKIA)联免疫吸附测定试剂盒

2-(4-羟)乙 98%Anti-eIF2 alpha/FITC  荧光素标记真核启动因子2α抗体IgG大鼠蛋白激抑制剂β(PKIB)联免疫吸附测定试剂盒

环已 CP,98%Anti-eIF4E/FITC  荧光素标记真核翻译起始因子4E抗体IgG大鼠蛋白激抑制剂γ(PKIG)联免疫吸附测定试剂盒


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