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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6619 |
商品介绍
测定意义 植物叶绿体中果糖1,6-二磷酸醛缩酶是光合作用中参与calvin循环的重要酶。催化果糖1,6-二磷酸和景天庚酮糖1,7-二磷酸的合成反应,在各种逆境胁迫下表现不同的响应。 测定原理 果糖1,6-二磷酸醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸生成3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮,在磷酸丙糖异构酶和α-磷酸甘油脱氢酶作用下催化NADH和磷酸二羟丙酮生成NAD和α-磷酸甘油,340nm处吸光值的变化可反映果糖1,6-二磷酸醛缩酶活性的高低。 自备实验用品及仪器 天平、震荡仪、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
Bacillus thuringiensis食管鳞状上皮癌抗原1检测试剂盒
Bacillus thuringiensisA1检测试剂盒
Bacillus thuringiensisMPRE1抗体检测试剂盒
Bacillus thuringiensis粘蛋白1抗体检测试剂盒
Bacillus thuringiensis脱嘌呤脱嘧核酸内切1抗体 检测试剂盒
Bacillus thuringiensis博卡病IgG抗体检测试剂盒
Bacillus thuringiensis博卡病IgM抗体检测试剂盒
Bacillus thuringiensis酮酸羧化检测试剂盒
果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)微量法检测试剂盒3A分子筛 80-100目,气相、液相色谱柱骨保护蛋白配体抗体(破骨分化因子)
分子筛3A 干燥剂用化成视网膜瘤抑癌蛋白抗体
分子筛, 3 Å pellets, 3-5 mmG蛋白信号转导调节因子2抗体
分子筛, 3 Å pellets, 2-3 mm核受体RXRα抗体
4A分子筛 20-40目,气相、液相色谱柱Rho相关蛋白激1抗体
4A分子筛 40-60目,气相、液相色谱柱环指蛋白156抗体
4A分子筛 60-80目,气相、液相色谱柱RRAD抗体
4A分子筛 80-100目,气相、液相色谱柱Runx3抗体
分子筛4A 2mm-3mm,干燥剂用Rad51抗体
分子筛, 4 Å beads, 4-8 mesh 维受体RAR α/RAR α抗体
分子筛, 4 Å beads, 8-12 mesh维受体β抗体
分子筛, 5 Å 20-40目,气相、液相色谱柱Ras相关区域家族1A抗体
分子筛, 5 Å 40-60目,气相、液相色谱柱抵抗素抗体
分子筛, 5 Å 60-80目,气相、液相色谱柱RhoA抗体
分子筛, 5 Å 80-100目,气相、液相色谱柱Rho相关蛋白激2抗体
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。