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选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6622 |
商品介绍:
测定意义
6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又称6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途径的中间产物,广泛存在于动植物体和微生物中。在糖酵解的第一步反应中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通过磷酸葡萄糖异构酶的催化形成果糖-6-磷酸,以继续糖酵解的其它步骤;而在戊糖磷酸途径中,葡萄糖-6-磷酸是其第一个底物,该过程也是生成NADPH的主要途径。此外,葡萄糖-6-磷酸也能转化形成糖原或淀粉而被储存起来。
测定原理:
6-磷酸葡萄糖脱氢酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8显橙黄色,在450 nm下测定吸光值。
需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
Anti-TERT/FITC 荧光素标记端粒逆转录抗体IgG
Anti-Tetracycline/FITC 荧光素标记四环素抗体IgG
Anti-Tetraspan5/FITC 荧光素标记四分子交联体5抗体IgG
Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172) /FITC 荧光素标记NF-κB活化激抗体IgG
Anti-T7 tag/FITC 荧光素标记T7 tag标签抗体IgG
Anti-T7 tag/HRP 辣根过氧化物标记T7 tag标签抗体IgG
Anti-TFF3 /FITC 荧光素标记三叶肽因子3抗体IgG
Anti-TFF2/FITC 荧光素标记三叶肽因子2抗体IgG
葡萄糖6磷酸(6PG)可见分光光度法检测试剂盒诱虫烯 分析标准品人EB病衣壳抗原(EBVCA)抗体(IgG)免疫试剂盒电子转移黄素蛋白脱氢抗体NYS48 NYS48蛋白抗体
诱虫烯 93%人EB病核抗原3A抗体(IgM)免疫试剂盒EGF素受体7跨膜结构域蛋白1抗体NXPH2 神经外营养蛋白2抗体
反-玉米素 98%人EB病核抗原3A抗体(IgG)免疫试剂盒乙激2抗体NXPH1 神经外营养蛋白1抗体
玉米素核苷 97%人EB病核抗原1(EBNA1)抗体(IgG)免疫试剂盒化Ets转录因子家族ets1抗体NUSAP1 核仁和纺锤体相关蛋白1抗体
两B 80%,750 μg/mg人EB病IgA(EBv IgA)免疫试剂盒化上皮癌转化蛋白2抗体Nurr1 核受体相关因子-1抗体
盐倍他司汀 99%人EB病(Ebv)抗体(IgM)免疫试剂盒嗜性粒过氧化物抗体Nur77/GFRP 孤儿核受体蛋白Nur77抗体
硫 1.5-2.0 units/mg 人EB病(EBv)抗体(IgG)免疫试剂盒核内切G抗体NUPR1/p8 核蛋白p8抗体
赫斯特荧光燃料,33258 98%人E3泛素蛋白连接TRIM68(TRIM68)抗体免疫试剂盒酪氨蛋白激受体A10抗体NUP88 核孔复合体蛋白88抗体
3,4-二氧 98%人E3泛素蛋白连接TRIM68(TRIM68)免疫试剂盒胞吐囊复合体蛋白2抗体NUP54 NUP54抗体
98%人D-脱氢(D-LDH)免疫试剂盒化4E结合蛋白1抗体NUP50 核孔蛋白50抗体
多烯紫杉 分析标准品,≥99%人D-免疫试剂盒化丝裂原活化蛋白激1/2抗体NUP37 核孔蛋白Nup37抗体
D-(+)-麦芽糖一水合物 ≥98.0% (HPLC)人D二聚体(D2D)免疫试剂盒泛素交联抗体NUP160 核孔蛋白NUP160抗体
美伐他汀 96%人DNA拓扑异构1()自身抗体免疫试剂盒EB病核抗原-3B抗体NUMB 膜相关蛋白Numb抗体
970 μg/mg (USP XXIV)(剧品)人DNA损伤诱导转录因子4样蛋白(DDIT4/RTP801)免疫试剂盒化驱动蛋白样蛋白1抗体NuMA 核有丝分裂器NuMA蛋白抗体
盐 分析标准品人DNA转移3A(DNMT3A)免疫试剂盒乙酰转移EID1抗体NUDEL/NDEL1 中心粒蛋白Nudel抗体