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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6624 |
商品介绍:
测定意义
ACP是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。
测定原理:
酸性条件下,ACP催化酪蛋白水解产生;在碱性条件下,还原磷钼酸化合物生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,通过测定其吸光度增加,来计算ACP活性。
自备仪器和样品:
水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
Pseudomonas fluorescensθ-防御素检测试剂盒
Pseudomonas marginalis聚乙二主链的IgG抗体检测试剂盒
Pseudomonas agarici单腺苷激活蛋白检测试剂盒
Pseudomonas synxantha还原黄素腺嘌呤二核苷酸检测试剂盒
Pseudomonas marginalis基质金属蛋白19检测试剂盒
Xanthobacter flavus基质金属蛋白20检测试剂盒
Gluconobacter sp.基质金属蛋白19检测试剂盒
Pseudonocardia kongjuensis基质金属蛋白20检测试剂盒
酸性蛋白酶可见分光光度法检测试剂盒LQ-690K的色带芯Anti-DRD5 receptor/FITC 荧光素标记抗多巴受体-D5抗体IgG鸡协同激分子受体(CMR)联免疫吸附测定试剂盒
氨环 98%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Disabled 1抗体IgG鸡环腺苷二核糖水解(cADPRH/CD38)联免疫吸附测定试剂盒
4-(氨) 97%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Disabled 1抗体IgG鸡钙联蛋白(CNX)联免疫吸附测定试剂盒
周效磺 96%Anti-Phospho-Dab1 (Ser491) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Disabled 1抗体IgG鸡碱性唾液脯氨丰富蛋白2(PRB2)联免疫吸附测定试剂盒
周效磺 分析标准品Anti-Phospho-DBC1 (Thr454) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化膀胱癌缺失因1IgG鸡周期素B(CCNB)联免疫吸附测定试剂盒
1,2-环己二 99%Anti-DAP-5/p97 /FITC 荧光素标记死亡相关蛋白5抗体IgG鸡原纤维蛋白1(FBN1)联免疫吸附测定试剂盒
natural, ≥98%, FCCAnti-DBC1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠膀胱癌缺失因1抗体IgG鸡激肽释放6(KLK6)联免疫吸附测定试剂盒
偏钙 39-44% B2O3 basis, 31-37% CaO basis, powderAnti-DAPK1/FITC 荧光素标记凋亡相关蛋白激1抗体IgG鸡凋亡蛋白激活因子1(APAF-1)联免疫吸附测定试剂盒
八-O-乙酰-D-(+)-蔗糖 98%Anti-DAPK2/FITC 荧光素标记凋亡相关蛋白激2抗体IgG鸡视网膜母瘤蛋白1(RB1)联免疫吸附测定试剂盒
β-D-葡萄糖五乙酯 98%Anti-DAPK3/FITC 荧光素标记凋亡相关蛋白激3抗体IgG鸡心肌钙黏蛋白(H-Cadherin)联免疫吸附测定试剂盒
曲 99%Anti-DARPP32/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠多巴、cAMP调节蛋白抗体IgG鸡色素P450家族成员26A1(CYP26A1)联免疫吸附测定试剂盒
α-D(+)-五乙酰葡萄糖 98%Anti-Phospho-DARPP32 (Thr34) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化多巴、cAMP调节蛋白抗体IgG鸡脂筏特征蛋白2(FLOT2)联免疫吸附测定试剂盒
乙酰溴-α-D-葡萄糖 包含 1% CaCO3 稳定剂, 98%Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化多巴、cAMP调节蛋白抗体IgG鸡抗心脂抗体IgG(ACA-IgG)联免疫吸附测定试剂盒
4,4'-四二氨二 98%Anti-phospho-Cyclin E(Thr395) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化周期素E抗体IgG鸡色素P450家族成员24A1(CYP24A1)联免疫吸附测定试剂盒
蒿本内酯 分析标准品,≥90%Anti-Crk p38 (phospho Y221) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Crk p38抗体IgG鸡状腺素抗体(TAb)联免疫吸附测定试剂盒