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商品介绍
测定意义 AKP是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于蛋白酶。此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。 测定原理: 在碱性条件下,AKP水解酪蛋白生成;在碱性条件下,还原磷钼酸生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,测定680nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。 自备仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、0.5 mL EP管和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/48样 | 微量法 | GOY-01S6627 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
钨粉 99.98% metals basis,1-5μm正癸 98%Anti-HSP-27/HRP 辣根过氧化物标记热休克蛋白27抗体IgG
硒基酸 99%正癸酸 Standard for GC,>99% (GC)Anti-P-fscn1/FITC 荧光素标记化纤维束蛋白同源物1/肌动蛋白集束蛋白/圆线虫紫癜 抗体IgG
ACS正癸酸 ≥98%, FCC, FGAnti-PG-C/FITC 荧光素标记胃蛋白原C抗体IgG
硫氢化钠,水合 68-72 %正癸酸 AR,99%Anti-PGC-1 Alpha/FITC 荧光素标记过氧化物体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗体IgG
钠 ACS正癸酸 CP,98%Anti-PGE2/FITC 荧光素标记前列腺素E2抗体IgG
乙酰苯 AR,99.0%正癸酸 分析标准品,≥99.5% (GC)Anti-PGRN /FITC 荧光素标记颗粒蛋白前体抗体IgG
乙酰苯 CP,99.0%十二 Standard for GC,>99.5%(GC)Anti-PH-4/FITC 荧光素标记脯水解4抗体IgG
分析标准品,C:71.09%,H:6.71%,N:10.36%十二 >98.0% (GC)Anti-PHB/FITC 荧光素标记抑制素/肿瘤抑制因子抗体IgG
碱性蛋白酶微量法检测试剂盒倍硫标准溶液 10μg/ml,u=6%大鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫试剂盒癌高表达蛋白Hec1抗体Goat Anti-Bovine IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗牛IgG
菊酯 分析标准品,99.5%(剧品)大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)免疫试剂盒化荷尔蒙敏感脂肪抗体Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗牛IgG
菊酯标准溶液 100μg/ml,u=3%(剧品)大鼠17-酮类固(17-KS)免疫试剂盒组蛋白去乙酰化1抗体Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗牛IgG
菊酯标准溶液 10μg/ml,u=6%(剧品)大鼠17-羟孕烯酮免疫试剂盒半糖转移2抗体Goat Anti-Bovine IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗牛IgG
氟菊酯标准溶液 100μg/ml,u=3%大鼠17羟孕酮(17-OHP)免疫试剂盒化异染色质蛋白1抗体(果蝇)Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗牛IgG
氟菊酯标准溶液 10μg/ml,u=4%大鼠17羟皮质类固(17-OHCS)免疫试剂盒异染色质蛋白1化抗体(果蝇)Goat Anti-Bovine IgG/PE PE标记的羊抗牛IgG
线 100μg/ml,u=3%(剧品)大鼠17-α睾酮(17-αMT)免疫试剂盒缺氧诱导因子2α /HIF-2α抗体Goat Anti-Bovine IgG/HRP 辣根过氧化物标记的羊抗牛IgG
线 10μg/ml,u=4%(剧品)大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)免疫试剂盒型流感病M2抗体Goat Anti-Bovine IgG/Gold 胶体金标记的羊抗牛IgG
炔氟草 分析标准品,99.4%大鼠12羟二十烷四烯(12-HETE)免疫试剂盒热休克蛋白-47抗体Goat Anti-Bovine IgG/FITC FITC标记的羊抗牛IgG
嘧磺隆 分析标准品,97%大鼠11β羟类固脱氢1型(11β-HSD1)免疫试剂盒人类状瘤病16抗体Goat Anti-Bovine IgG/Cy7 Cy7标记的羊抗牛IgG
氟 分析标准品,99%大鼠1,4,5-三肌(IP3)免疫试剂盒缺氧诱导因子1α 抗体HIF-1αGoat Anti-Bovine IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗牛IgG
氟节 分析标准品,97%大鼠1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD glucosidase)免疫试剂盒组蛋白H3抗体Goat Anti-Bovine IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗牛IgG
解草 分析标准品,99.3%大鼠1,25-二羟(3)24-羟化,线粒体(CYP24A1)免疫试剂盒人类疱疹病8抗体/疱疹病8型Goat Anti-Bovine IgG/Cy3 Cy3标记的羊抗牛IgG
氟吡氧乙 分析标准品,97%大鼠1,25二羟3(1,25 DHVD3)免疫试剂盒人类巨病抗体Goat Anti-Bovine IgG/Bio 标记的羊抗牛IgG
标准溶液 10μg/m,u=6~2%,酮大鼠 SCUBE1 免疫试剂盒人类疱疹病8抗体Goat Anti-Bovine IgG/APC APC标记的羊抗牛IgG