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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
货号 | GOY-01S6642 |
商品介绍:
测定意义
LOX广泛存在于动植物组织中,催化不饱和脂肪酸氧化反应,导致膜脂过氧化。在生物体的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。
测定原理:
LOX催化氧化,氧化产物在280nm处有特征吸收峰;测定280nm吸光度增加速率,来计算LOX活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
Saccharomyces cerevisiae褪黑素受体1A检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiaeXII检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiaeSLC22A5检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae破骨关联受体检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae旋毛虫IgG抗体检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae黄体生成素释放检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae肝配蛋白B受体2检测试剂盒
Saccharomyces cerevisiae性;通透性增加蛋白检测试剂盒
脂氧合酶 (LOX)紫外分光光度法检测试剂盒4--4'-羟二酮 98%小鼠血栓素B2(TXB2)免疫试剂盒化促皮质激素ACTH抗体TPX2 微管相关同源蛋白TPX2抗体
二 99%小鼠血栓素A2(TXA2)免疫试剂盒化蛋白激AKT1抗体TPTE 肿瘤/抗原44抗体
4,4'-二二酮 99%小鼠血栓前体蛋白(TpP)免疫试剂盒化蛋白激B抗体TPST2 酪蛋白硫转移2抗体
2,4-二羟二酮 99%小鼠血清淀粉样蛋白A3(SAA3)免疫试剂盒化钠ATP蛋白a1抗体TPST1 酪蛋白硫转移1抗体
4,4'-二羟二酮 98%小鼠血浆激肽释放(KLKB1)免疫试剂盒化内收蛋白a1抗体TPSB2 肥大类胰蛋白β2
2-羟-4-氧-5-磺二酮 98%小鼠血红素氧合2(HO-2)免疫试剂盒化腺苷单活化蛋白激α1抗体TPP1/CLN2 生长抑制因1蛋白抗体
4-羟二酮 98%小鼠血红素氧合1(HO-1)免疫试剂盒化腺苷单活化蛋白激α2抗体TPO/Thrombopoietin 血小板生成素抗体(巨核集落激因子)
2-羟-4-氧二酮 99%小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)免疫试剂盒性神经酰1抗体TPO 状腺过氧化物抗体
98%小鼠血管舒缓激肽(BK)免疫试剂盒粘附调节分子1抗体TPH2 5色氨羟化2抗体
4,4'-二氟二酮 99%小鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)免疫试剂盒气味结合蛋白抗体TPH/Trptophan Hydroxylase 色氨羟化抗体
4-硝二酮 99%小鼠血管生成素4(ANG-4)免疫试剂盒乙脱氢2抗体TPD54/TPD52L2 肿瘤蛋白D54蛋白抗体
2-并咪唑 98%小鼠血管生成素2(ANG-2)免疫试剂盒膜粘连蛋白10抗体TPD52L1/D53 肿瘤蛋白D53抗体
氧乙钠 98%小鼠血管生成素1(ANG-1)免疫试剂盒前梯度同源蛋白2抗体TPD52/Prostate and colon associated protein 前列腺癌和结肠癌相关蛋白
1,4-萘醌 95%小鼠血管生长素(ANG)免疫试剂盒乙脱氢5抗体TPA/PLAT 组织型纤溶原激活剂抗体
Celite® 硅藻土545 助滤剂,碳钠处理,通量煅烧小鼠血管内皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫试剂盒通用转录因子IIA样因子抗体TP53TG5 p53靶蛋白5抗体