磷脂酶D(PLD)可见分光光度法检测试剂盒-上海谷研实业有限公司手机版

详细介绍

商品属性：

产品名称	磷脂酶D(PLD)可见分光光度法检测试剂盒
规格	50管/48样
检测方法	可见分光光度法
货号	GOY-01S6656

商品介绍：

测定意义

磷脂酶D（EC3.1.4.4）即磷脂酰水解酶，是催化磷酸二酯键水解和碱基交换反应的一类酶的总称，广泛存在于高等动植物和细菌等多种生物体中，具有参与细胞脂质代谢、信号传导、生物膜形成的抗逆境胁等生理功能。

测定原理

磷脂酶D催化水解磷脂酰末端的磷脂酰二酯键生成磷脂酸和，在氧化酶催化作用下生成甜菜碱和过氧化氢，过氧化氢在过氧化氢酶的作用下将4-氨基林和重蒸酚氧化成粉红色物质，在500nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅，无水乙醇。

实验方法学：

一、肝素的配制：

市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集：

全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

0.5mm四氟板 0.5mm厚度2,2'-硫代二乙酸 98%Anti-HLA-DR/FITC 荧光素标记HLA-DR抗原抗体IgG

，99.0% 4,4'-二甲苯亚砜 97%Anti-HLA-E/FITC 荧光素标记人类白抗原EIgG

碳酸锰 99.95% metals basis基硫 99%Anti-HLA-G/FITC 荧光素标记人类白抗原G/组织相容性白抗原G抗体IgG

碳酸锰 CP，Mn >44%对甲苯硫酚 99%Anti-HMGA1/FITC 荧光素标记高迁移率族蛋白A1抗体IgG

硝酸锰溶液 CP，50 wt. % in H2O愈创木油 Anti-HMGA2/FITC 荧光素标记高迁移率族蛋白A2抗体IgG

,四水 AR,99.0%愈创木酚 >99.0%(GC)Anti-HMGB1/FITC 荧光素标记高迁移率族蛋白B1抗体IgG

,四水昆虫培养级，≥99% 98%Anti-HMGB4/FITC 荧光素标记高迁移率族蛋白B4抗体IgG

苯并咪唑 AR,98.5% 98%Anti-HNF-1 Alpha/FITC 荧光素标记肝核因子1α抗体IgG

磷脂酶D(PLD)可见分光光度法检测试剂盒氧化锗 99.99% metals basis,200目Anti-CK16/FITC 荧光素标记角蛋白16抗体IgG鸡趋化因子C-C-元配体14(CCL14)联免疫吸附测定试剂盒

硫铜，五水 ACS，98.0-102.0%Anti-CK17/FITC 荧光素标记角蛋白17抗体IgG鸡过氧化还原2(PRDX2)联免疫吸附测定试剂盒

氧化钡 AR,97.0% Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) /FITC 荧光素标记化角蛋白17抗体IgG鸡内皮素受体B(ETRB)联免疫吸附测定试剂盒

氧化钡 99.5%Anti-CK18/FITC 荧光素标记角蛋白18抗体IgG鸡脂酰肌蛋白聚糖3(GPC3)联免疫吸附测定试剂盒

氧化钡 SPAnti-CK18(C-term) /FITC 荧光素标记角蛋白18抗体（C端）IgG鸡核孔蛋白85kda(NUP85)联免疫吸附测定试剂盒

氧化钡 99.95% metals basisAnti-CK18/FITC 荧光素标记角蛋白18抗体IgG鸡脂D2(PLD2)联免疫吸附测定试剂盒

钡 99.9% metals basisAnti-CK19/FITC 荧光素标记角蛋白19抗体IgG鸡神经保护因子(CVNPF)联免疫吸附测定试剂盒

水质钡标样浓度范围:0.834(mg/L)，分析标准品Anti-CK19/Gold 胶体金离子标记角蛋白19抗体IgG鸡质金属蛋白17(MMP-17)联免疫吸附测定试剂盒

钡 99%Anti-CK19/FITC 荧光素标记角蛋白19抗体IgG鸡胃泌素释放肽前体(ProGRP)联免疫吸附测定试剂盒

硫铈,四水 AR，98%Anti-CK19/RBITC 红色荧光素罗丹明标记角蛋白19抗体IgG鸡红生成素受体(EPOR)联免疫吸附测定试剂盒

硝铈，六水 99.95% metals basisAnti-CK20/FITC 荧光素标记角蛋白20抗体IgG鸡线粒体乙脱氢(ALDM)联免疫吸附测定试剂盒

醋铈 99.9% metals basisAnti-CK34 BetaE12/FITC 荧光素标记高分子量角蛋白CK34βE12抗体IgG鸡神经营养因子4(NT-4)联免疫吸附测定试剂盒

硝铒，五水 99.9% metals basisAnti-CK-HMW/FITC 荧光素标记高分子量角蛋白抗体IgG鸡成纤维生长因子受体4(FGFR4)联免疫吸附测定试剂盒

硫铒(III)八水化合物 99.9% metals basisAnti-CKMT2/FITC 荧光素标记肌激2抗体IgG鸡载脂蛋白B(ApoB)联免疫吸附测定试剂盒

硝钆,六水 AR，99%Anti-CKIP-1/FITC 荧光素标记酪蛋白激2相互作用蛋白1抗体IgG鸡26S蛋白体(26S-PSM)联免疫吸附测定试剂盒

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。

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