考马斯亮蓝法蛋白含量可见分光光度法

考马斯亮蓝法蛋白含量可见分光光度法

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2022-04-28 10:06:39
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产品简介

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活体细胞

详细介绍

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

考马斯亮蓝法蛋白含量可见分光光度法

50管/48样

可见分光光度法

GOY-01S6967

商品介绍

测定意义

在酸性溶液中,考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在620nm处有最大吸收峰, 其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

胍碳酸氢盐 98.5%氯标准溶液2.74-248mg/L,用于水质分析Anti-CD6/TP120/FITC  荧光素标记CD6抗体IgG

敌草索  分析标准品浓度范围:19.6-247(mg/L),分析标准品Anti-CD7/FITC  荧光素标记抗CD7抗体IgG

氯酞酸二甲酯  96%水质、钠、钙与镁混合标样 分析标准品Anti-CD8/FITC  荧光素标记CD8蛋白抗体IgG

对苯二 98%硫化物标准溶液100mg/mL,基体:0.6 mg/L,1.6 mg/L,0.8 mg/LAnti-CD9/MRP-1/FITC  荧光素标记CD9抗体IgG

溴代炔 99%水质二氧化硫(甲法)(水剂)标样0.5 mg/L,0.6 mg/L,0.4 mg/LAnti-CD10/CALLA/FITC  荧光素标记CD10抗体IgG

五氯吡 98%三氯乙烯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:甲Anti-CD13/FITC  荧光素标记氨肽N抗体IgG

3-氯炔 99%甲中1,2,4-三氯苯标样 分析标准品Anti-CD14/FITC  荧光素标记CD14蛋白抗体IgG

四氟对苯二 99%四氯乙烯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:甲Anti-CD17/FITC  荧光素标记CD17抗体IgG

考马斯亮蓝法蛋白含量可见分光光度法4-羟基壬烯酸(HNE)免疫试剂盒进口、组装

大鼠血纤蛋白原(Fbg)免疫试剂盒*直销

犬前列腺素F2α(PGF2α)免疫试剂盒*直销

鸡肌红蛋白(MYO/MB)免疫试剂盒进口、分装

大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)免疫试剂盒进口、分装

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牛白介素4(IL-4)免疫试剂盒进口、组装

精胺合成(SRM)免疫试剂盒现货供应

兔子Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)免疫试剂盒现货供应

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。


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