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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 100管/48样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6542 |
商品介绍:
测定意义
ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
测定原理:
在酸性环境中,ACP催化磷酸苯二钠水解生成,与4-氨基安替和反应生成红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
人抗BP180抗体Anti-SEMA4D Antibody干扰素诱导蛋白10检测试剂盒
大鼠间粘附分子3Anti-SENP1 Antibody干扰素诱导蛋白10检测试剂盒
大鼠纤溶原激活物抑制因子1Anti-SENP2 Antibody干扰素诱导蛋白4检测试剂盒
人抗BB抗体Anti-SENP7 Antibody干因子检测试剂盒
小鼠皮质Anti-SENP7 Antibody干因子受体检测试剂盒
人抗平滑肌抗体Anti-SENP3 Antibody高尔基体蛋白73检测试剂盒
小鼠促甲状腺素Anti-SENP5 Antibody高密度脂蛋白检测试剂盒
大鼠纤溶原激活物抑制因子Anti-SEPHS1 Antibody高密度脂蛋白胆固检测试剂盒
酸性磷酸酶(ACP)微量法检测试剂盒壬酚 GR大鼠间粘附分子2(ICAM-2)免疫试剂盒G蛋白偶联胆汁受体1IRF4 干扰素调节因子4抗体
1,5-戊二 97%大鼠间粘附分子1(ICAM-1)免疫试剂盒葡萄糖6-脱氨1抗体IRF3 干扰素调节因子3
CP,≥99% (GC) 大鼠分裂周期因(CDC)免疫试剂盒葡萄糖6-脱氨2抗体IRF-1/MAR1 干扰素调节因子1抗体
炔 99%(剧品)大鼠性T淋巴相关抗原4(CTLA-4/CD152)免疫试剂盒葡萄糖6-N-乙酰转移1抗体IRAK4 白介素-1受体相关激4抗体
≥97% (HPLC)大鼠凋亡调节因子BAX(BAX)免疫试剂盒谷氨酰1抗体IRAK2 白介素-1受体相关激2抗体
三化铬(III) 六水合物 CP,98%大鼠硒蛋白P(SEPP1)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR161蛋白抗体IRAK1 白介素-1受体相关激1抗体
化钡,二水 AR,99.5%大鼠戊糖素(Pentosidine)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR180蛋白抗体IQGAP1 支架蛋白抗体
化钡,二水 99.99% metals basis大鼠五聚素3(PTX3)免疫试剂盒G蛋白通路抑制物蛋白2抗体IQCK IQCK蛋白抗体
氢氧化钡,八水 CP,97%大鼠胃泌调节素免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR177蛋白抗体IQCJ IQCJ蛋白抗体
氟化钙 CP,98.0%大鼠胃泌素(Gastrin)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR89A蛋白抗体IQCG IQCG蛋白抗体
二氧化硫脲 98%大鼠胃动素受体(MTLR)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPRSP2蛋白抗体IQCF1 IQCF1蛋白抗体
硫脲 AR,99%大鼠胃动素(MTL)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPRC5C蛋白抗体IQCE IQCE蛋白抗体
二化双(三环己膦)镍(II) 97%大鼠胃蛋白(PG)免疫试剂盒G蛋白偶联受体结合蛋白α14/Gα 14 抗体IQCD IQCD蛋白抗体
三正丁氧化膦 95%大鼠K1(VK1)免疫试剂盒G蛋白β样蛋白抗体IQCC IQCC蛋白抗体
97%大鼠E(VE)免疫试剂盒G蛋白β5/Gβ 5 抗体IQCA1 IQCA1蛋白抗体