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选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 100管/96样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6546 |
商品介绍:
测定意义
哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。
测定原理:
CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固篮显色;在450 nm光吸收增加速率,计算CarE活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
三氟化乙酸络合物 98%DL-α-异丁酸 98%Anti-CK7 抗角蛋白7抗体
三氟化乙 46.5%BOC-L-缬 99%Anti-CK10 角蛋白10抗体
三氟化乙 98%BOC-D- 98%Anti-CK5+6 角蛋白5+6抗体
三氟化四络合物 48-50%溶液1-苄基哌 97%Anti-CK6 角蛋白6抗体
三氟化乙络合物 97%BOC-D-缬 98%Anti-CK8 角蛋白8抗体
三氟化甲络合物 50-52 wt% BF3 巴豆酸 98%Anti-CKLFSF2 趋化素样因子超家族成员2抗体
丹皮酚 99%Fmoc-beta- 99%Anti-CK1+5+10+14 高分子量角蛋白抗体
叔丁 GR,≥99.5% (GC)N-羟基硫代琥珀酰亚 98%Anti-CK-HMW 高分子量角蛋白抗体
羧酸酯酶(CarE)微量法检测试剂盒2,6-二 98%大鼠白抗原DR(HLA-DR)免疫试剂盒高密度脂蛋白抗体GRB10 生长因子受体结合蛋白10抗体
2,6-二 99%大鼠白活化黏附因子(ALCAM)免疫试剂盒蛋白激底物相关蛋白抗体GRASP65 高尔体外周膜蛋白p65抗体
2,6-二氟 98%大鼠白三烯E4(LTE4)免疫试剂盒艾滋病病抗体GRAP2 生长因子受体结合蛋白2相关接头蛋白2抗体
2,6-二氟酰 97%大鼠白三烯D4(LTD4)免疫试剂盒流感病H3N2血凝素抗体Granzyme K 颗粒K抗体
2,6-二 99%大鼠白三烯C4(LTC4)免疫试剂盒人瘤病16型L2抗体Granzyme D/B/E/N/G/F/H 颗粒D/B/E/N/G/F/H抗体
骈三氮唑 99%大鼠白三烯B4(LTB4)免疫试剂盒A型病H7N9 M1蛋白抗体GRAMD3/NS3TP2 型肝炎病-NS3反转录激活蛋白2抗体
骈三氮唑 CP,97%大鼠白介素9(IL-9)免疫试剂盒水蛭素抗体GRAMD2 GRAM结构域蛋白2抗体
D-海藻糖,无水 99%大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒副肿瘤综合症小脑变性相关蛋白抗体GPX4 过氧化4抗体
木瓜蛋白 ≥3 units/mg大鼠白介素7受体(IL-7R)免疫试剂盒植物热休克蛋白93抗体GPX3 过氧化3
D-(+)-海藻糖 二水合物 from Saccharomyces cerevisiae, ≥99%大鼠白介素7(IL-7)免疫试剂盒重组人瘤病抗体GPX1 过氧化1
D-海藻糖,二水 分析标准品大鼠白介素6受体(IL-6R)免疫试剂盒长链烯脂酰辅A脱氢抗体GPVI/Glycoprotein VI 糖蛋白VI/六糖蛋白抗体
D-海藻糖,二水 用于和昆虫培养, ≥99%大鼠白介素6(IL-6)免疫试剂盒羟辅A脱氢β抗体GPV/Goose parvovirus 鹅细小病GPV抗体
D-海藻糖,二水 用于植物培养, ≥99%大鼠白介素5(IL-5)免疫试剂盒三羟辅A裂解抗体GPSM2 G蛋白信号调节蛋白2抗体
肌,一水 BR大鼠白介素4(IL-4)免疫试剂盒高密度脂蛋白抗体GPSM1 G蛋白信号调节蛋白1抗体
无水肌 98%大鼠白介素35(IL-35)免疫试剂盒化三羟辅A还原抗体GPS1/CSN1 G蛋白通路抑制蛋白1抗体