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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 100管/48样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6548 |
商品介绍:
测定意义
ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
测定原理:
肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。
自备仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
有丝分裂周期蛋白MPP9抗体Human ODAM ELISA Kit白屈菜红碱
减数分裂特异核结构蛋白1抗体Human NXN ELISA Kit樟脑
肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体Human ODF2 ELISA Kit莰烯
珠蛋白1抗体Human ODF1 ELISA Kitβ-连环蛋白抗体流式组化
间充质同源盒蛋白2抗体Human ODF3 ELISA Kit
G蛋白偶联受体MRGX1抗体Human NXN ELISA Kit磷酰二肽
黑色素瘤相关抗原11抗体Human ODF2L ELISA KitN-乙酰-L-
G蛋白偶联受体MAS相关蛋白抗体Human HSP90AA1(Heat shock protein HSP 90-alpha) ELISA Kit2”-O-没食子酰基金丝桃苷
ATP含量微量法检测试剂盒β-环糊精 96%IL-11 ELISA Kit 大鼠白介素11豚鼠补体因子4 (C4)联免疫吸附测定试剂盒
2- 98%IGFBP-4 ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4豚鼠神经粘附分子(NCAM/CD56)联免疫吸附测定试剂盒
吡-2,3-二羧 97%IGFBP-3 ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3豚鼠多巴受体D2(D2R/DRD2)联免疫吸附测定试剂盒
3- 98%VEGF-D ELISA Kit 大鼠血管内皮生长因子D豚鼠cGMP依赖性蛋白激I (PRKG1)联免疫吸附测定试剂盒
2,3,5-吡 99%IGFBP-2 ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2豚鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)联免疫吸附测定试剂盒
7-氨 97%IGFBP-1 ELISA Kit 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1豚鼠蛋白激C(PKC)联免疫吸附测定试剂盒
2-并咪唑乙 97%VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 大鼠血管内皮生长因子受体1豚鼠/抗复合物(TAT)联免疫吸附测定试剂盒
5-溴-7-硝二氢 98%VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 大鼠血管内皮生长因子受体2豚鼠多形核白弹性蛋白(PMN Elastase)联免疫吸附测定试剂盒
5-溴代 98%HGF ELISA Kit 大鼠肝生长因子豚鼠胆固调节元件结合蛋白(SREBP)联免疫吸附测定试剂盒
4-溴 98%gp130 ELISA Kit 大鼠糖蛋白130豚鼠血小板激活因子ib3(PAFAHIB3)联免疫吸附测定试剂盒
5- 99%GH ELISA Kit 大鼠生长激素豚鼠双皮质激素样激1(DCLK1)联免疫吸附测定试剂盒
5--1,3,3--2-亚啉 90%G-CSF ELISA Kit 大鼠粒集落激因子豚鼠硫氧化还原蛋白(Trx)联免疫吸附测定试剂盒
7-喹哪 99%NAP-2/CXCL7 ELISA Kit 大鼠中性粒趋化蛋白2豚鼠半凝集素8(GAL8)联免疫吸附测定试剂盒
2-()并咪唑 96%Flt3 ELISA Kit 大鼠FMS样酪氨激3豚鼠可溶性血纤蛋白单体复合物(sFMC)联免疫吸附测定试剂盒
1,2-二 99%Flt3L ELISA Kit 大鼠FMS样酪氨激3配体豚鼠CD163分子(CD163)联免疫吸附测定试剂盒