ATP含量微量法检测试剂盒

ATP含量微量法检测试剂盒

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2022-04-27 09:22:47
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产品简介

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详细介绍

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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商品属性:

产品名称

ATP含量微量法检测试剂盒

规格

100管/48样

检测方法

微量法

货号

GOY-01S6548

商品介绍:

测定意义

ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。

测定原理:

肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。

自备仪器和用品:

分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

有丝分裂周期蛋白MPP9抗体Human ODAM ELISA Kit白屈菜红碱

减数分裂特异核结构蛋白1抗体Human NXN ELISA Kit樟脑

肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体Human ODF2 ELISA Kit莰烯

珠蛋白1抗体Human ODF1 ELISA Kitβ-连环蛋白抗体流式组化

间充质同源盒蛋白2抗体Human ODF3 ELISA Kit

G蛋白偶联受体MRGX1抗体Human NXN ELISA Kit磷酰二肽

黑色素瘤相关抗原11抗体Human ODF2L ELISA KitN-乙酰-L-

G蛋白偶联受体MAS相关蛋白抗体Human HSP90AA1(Heat shock protein HSP 90-alpha) ELISA Kit2”-O-没食子酰基金丝桃苷

ATP含量微量法检测试剂盒β-环糊精 96%IL-11 ELISA Kit  大鼠白介素11豚鼠补体因子4 (C4)联免疫吸附测定试剂盒

2- 98%IGFBP-4 ELISA Kit  大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4豚鼠神经粘附分子(NCAM/CD56)联免疫吸附测定试剂盒

-2,3-二羧 97%IGFBP-3 ELISA Kit  大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3豚鼠多巴受体D2(D2R/DRD2)联免疫吸附测定试剂盒

3- 98%VEGF-D ELISA Kit  大鼠血管内皮生长因子D豚鼠cGMP依赖性蛋白激I (PRKG1)联免疫吸附测定试剂盒

2,3,5-吡 99%IGFBP-2 ELISA Kit  大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2豚鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)联免疫吸附测定试剂盒

7-氨 97%IGFBP-1 ELISA Kit  大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1豚鼠蛋白激C(PKC)联免疫吸附测定试剂盒

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5-溴代 98%HGF ELISA Kit  大鼠肝生长因子豚鼠胆固调节元件结合蛋白(SREBP)联免疫吸附测定试剂盒

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