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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
50管/24样 | 可见分光光度法 | GOY-01S6549 |
商品介绍
测定意义 ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。 测定原理: 肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。 自备仪器和用品: 分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
亚铈八水 99.9% metals basis硫化物标准溶液 100mg/L,溶剂:水Anti-CD3/FITC 荧光素标记CD3蛋白抗体IgG
亚铈,无水 97%硫化物标准溶液 硫离子:50~100µg/mLAnti-CD3/RBITC 红色荧光素罗丹明标记CD3抗体IgG
化镍 CP,98.0% 度范围:0.038-0.997mg/L,分析标准品Anti-CD3/PE 荧光素PE标记CD3抗体IgG
铌粉 99.95% metals basis,325目水质氨氮标样浓度范围:1.1mg/L,0.5mg/L,2.7mg/LAnti-CD4/FITC 荧光素标记CD4蛋白抗体IgG
偏钒酸银 CP水质铜、铅、锌、镉、镍与铬混合标样 分析标准品 Anti-CD4/RBITC 红色荧光素罗丹明(RBITC)标记CD4抗体IgG
氧化钐 99.99% metals basis水质氟、氯、根与硝酸根混合标样 分析标准品Anti-CD4/PE 荧光素PE标记CD4抗体IgG
亚硝酸钴钠 AR,Co 13.5~14.5%水质氟、氯与根混合标样 分析标准品Anti-CD5/FITC 荧光素标记CD5抗体IgG
锆粉 99.5% metals basis ((不包括铪)),200 目浓度范围:0.125-2.22mg/L,分析标准品Anti-CD5L/Api6/FITC 荧光素标记CD5L抗体IgG
ATP含量可见分光光度法检测试剂盒酚标准溶液 1000μg/ml兔抗小鼠IgG-Fc
酚标准溶液1.000g/ml,体:0.02mol/L NaOH溶液兔抗猪IgG
石油类(红外法)标准溶液 1000μg/ml,溶剂:四化碳兔抗猪IgG抗血清
五标准溶液溶剂:兔抗大鼠IgG抗血清
水质pH标样 浓度范围:4.10-9.18(mg/L),分析标准品小鼠抗大鼠IgG
水质高锰盐指数标样 浓度范围:2.61-5.91(mg/L),分析标准品兔抗大鼠IgG
水质盐标准溶液小鼠抗兔IgG
水质总标样 浓度范围:1.000-2.000(mg/L),分析标准品兔抗小鼠IgG
酚类混合标准溶液每个品种:1038±19ug/ml,溶剂:兔抗猴IgG
多环芳烃混合标准溶液溶剂:兔抗大鼠IgM
多联(Aroclor 1242)标准溶液小鼠抗兔IgM
多联(Aroclor 1254)标准溶液兔抗大鼠IgM抗血清
多联(Aroclor 1260)标准溶液羊抗兔IgG抗血清
间二酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:驴抗兔IgG抗血清
水质硒标样 浓度范围:4.95-20.2(mg/L),分析标准品羊抗小鼠IgM
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。