ATP含量HPLC法检测试剂盒

48T/96TATP含量HPLC法检测试剂盒

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具体成交价以合同协议为准
2022-04-27 09:25:00
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产品简介

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详细介绍

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商品属性:

产品名称

ATP含量HPLC法检测试剂盒

规格

50管/48样

检测方法

HPLC法

货号

GOY-01S6550

商品介绍:

测定意义

ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。

测定原理:

肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。

自备仪器和用品:

分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

L-缬甲酯盐酸盐 99%斯皮诺素 分析标准品,≥97%Anti-MDM2  双微体2癌基因抗体

环烷羧酸 98%水飞蓟宁 分析标准品,≥98% Anti-Phospho-MDM2 (Ser166)  化双微体2癌基因抗体

吡咯烷 99%水飞蓟亭 分析标准品,≥98% Anti-MDR1/p-GP/CD243  多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体

1-四氢萘酮 97% 分析标准品,≥98%Anti-MEF2A  肌增强因子2抗体

钨酸铵 99.99% (metals basis)茵芋苷 分析标准品,≥98%Anti-Phospho-MEF2A (Thr312)  化肌增强因子2抗体

钨酸铵 AR,99%知母皂苷元 分析标准品,≥98% Anti-Phospho-MEF2A (Ser408)  化肌增强因子2抗体

仲钨酸铵 99.95 %千金藤碱  分析标准品,≥98%Anti-Megsin  蛋白抑制剂B7抗体

钼酸铵,四水 AR五味子素 分析标准品,≥98%Anti-Melamine  三聚抗体

ATP含量HPLC法检测试剂盒聚烯酰 非离子型,分子量:200万-1400万丝氨蛋白/线粒体丝氨蛋白多肽抗原

N-邻 99%离子钙接头蛋白抗原

萝卜硫素 90%小肠型脂肪结合蛋白抗原

异龙脑酯 95%干扰素诱导跨膜蛋白1抗原

亚钠 80%干扰素-α抗原(人)

N,N-二乙-2--1,4- 99%干扰素-gamma受体1抗原

超细球形铜粉 99.9%,D50(0.2~0.55μm) 胰岛素样生长因子结合蛋白-2(多肽)

2,4-二-3,5-二硝三氟 97%胰岛素样生长因子结合蛋白-3抗原

2,4,5-三嘧 98%胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原

2-酰酯 98%KB抑制蛋白β(多肽)

氨乙缩二 97%KB抑制蛋白α抗原

4-乙烯  98% 白介素12抗原(白介素-12)

纳米氮化铝 99.9% metals basis,50nm白介素12抗原(人)

六方氮化 99.9% metals basis,1~2μm白介素-12受体β2抗原

碳化 1-10 μm,98%白介素13抗原

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

 


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