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测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6565 |
商品介绍
测定意义 TH位于线粒体的内膜上,又称为线粒体复合体六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互转化,调节线粒体NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。 测定原理: NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+还原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,测定375nm光吸收的增加速率,来计算TH-2活性。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
甲基异丁酮 CP,98.0%氧化镝 40nm 球形,99.5%Anti-KLF6/FITC 荧光素标记转染抑癌基因KLF6抗体IgG
正 AR,99.0% 氧化镝 ≥99.9% metals basisAnti-KLF8/FITC 荧光素标记KLF样转录因子8抗体IgG
四 AR,99.0%金属镝 99.9% (REO)Anti-KLF9/FITC 荧光素标记转录因子KLF9抗体IgG
4-溴-2-氟苯甲 98%氟化镝 99.99% metals basisAnti-KLF13/RFLAT-1 /FITC 荧光素标记肠道内富含的Kruppel样因子13抗体IgG
1-溴-2-氟-4-苯 97%溴化镝(III) 无水, 粉末, 99.99% metals basisAnti-KLK1/FITC 荧光素标记激肽释放1抗体IgG
2,5-二氯苯甲 98%化镝(III) 无水, 鳞片, 99.99% metals basisAnti-KLK3/FITC 荧光素标记激肽释放3/3抗体IgG
3-氟苯 98%镝(III),八水 99.9%Anti-KLK4/FITC 荧光素标记激肽释放4抗体IgG
L-天冬酰 一水合物 99%镝(III) 99.99% metals basisAnti-KLK7/FITC 荧光素标记激肽释放7抗体IgG
转氢酶1微量法检测试剂盒位庚内酯 Standard for GC ,>98.5% (GC)PE-Cy7标记的兔抗马IgM
椰子 98%PE-Cy3标记的兔抗马IgM
椰子 98%, FCC, KosherPE-CY5标记的兔抗马IgM
丁位壬内酯 98%PE-Cy3标记的兔抗马IgG
丁位壬内酯 98%, FCC, KosherCy5标记的羊抗人IgM
位辛内酯 99%FITC标记的羊抗人IgM
位辛内酯 98%, FCC,KosherFITC标记的羊抗人IgG
丁位辛内酯 98%胶体金标记的羊抗人IgG
丁位十一内酯 98%FITC标记的兔抗人IgG
2- CP(剧品)辣根过氧化物标记的兔抗马IgM
2- GR(剧品)Alexa Fluor 488标记的羊抗人IgG
2- Standard for GC(剧品)Alexa Fluor 647标记的小鼠抗人IgG
钨 99.95%,0.5mm 直径PE标记的鼠抗人IgG单克隆抗体
钨 99.95%,0.1mm 直径辣根过氧化物标记兔抗人IgA
钨 9.95%,50μm 标记的鼠抗人IgG单克隆抗体