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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
货号 | GOY-01S6566 |
商品介绍:
测定意义
TH位于线粒体的内膜上,又称为线粒体复合体六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互转化,调节线粒体NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。
测定原理:
NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+还原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,测定375nm光吸收的增加速率,来计算TH-2活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
1-丁基-3-甲基咪唑辛盐 99%4-羟基苯甲酰肼 98%Anti-5-HT/RBITC 红色罗丹明标记5-羟色抗体IgG
1-丁基-3-甲基咪唑盐 95%草酰乙酸 98%Anti-5-HTR1A/FITC 荧光素标记5-羟色受体1A抗体IgG
5-溴异喹啉 98%无水草酸 anhydrous, 99.0%Anti-5-HTR1B /FITC 荧光素标记5-羟色受体1B抗体IgG
5-溴-7-氮杂 98%无水草酸 AR,98%Anti-5-HTR2A/FITC 荧光素标记5-羟色受体2A抗体IgG
N-(叔丁氧羰基)-1,4-丁二 97%无水草酸 99.999% metals basisAnti-5-HTR2B/FITC 荧光素标记5-羟色受体2B(5-HT/serotonin R2B)抗体IgG
N-丁基溴化吡 99%无水草酸 99.99% metals basisAnti-5-HTR3/FITC 荧光素标记5-羟色受体3抗体IgG
1-丁基-3-甲基咪唑溴盐 97%1-重氮-2-萘酚-4-磺酸 98%Anti-5-HTR4/FITC 荧光素标记5-羟色受体4抗体IgG
1-丁基-3-甲基咪唑四氟酸盐 97%肼黄 Biological stainAnti-5-LOX/FITC 荧光素标记5-脂氧合抗体IgG
转氢酶1紫外分光光度法检测试剂盒乙锌,二水 AR,99.0%猫p27核心抗原(P27)免疫试剂盒F-box蛋白家族FBXO18抗体MIF 巨噬移动抑制因子抗体
氧化锌 AR,99%猫5羟色/血清素/血清(5HT/ST)免疫试剂盒FRG2B蛋白抗体MIER2 中胚层诱导早期反应蛋白2抗体
硫锌,七水 99.995% metals basis马ELISA试剂盒FAM71A蛋白抗体Midnolin isoform Protein 1 中脑核仁蛋白1抗体
碱式碳锌 AR,57.5%马转化生长因子β2(TGFB2)免疫试剂盒FAM83F蛋白抗体MIDN 中脑核仁蛋白抗体
硫铜,五水 高纯级马肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒FBXL17蛋白抗体Midkine 中期因子/肝素结合生长因子抗体
磺 70%水溶液马孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒FCHSD1蛋白抗体MID2/RNF60/Midline-2 环指蛋白60抗体
硫镍,七水 GR,99%马2,3-双加氧1(IDO1)免疫试剂盒FBXL5蛋白抗体MID1/Midline-1/RNF59 环指蛋白59抗体
溴化镍 22.5%水溶液马胰腺甘油三酯脂(PNLIP)免疫试剂盒FBXL12蛋白抗体MICS1 生长激素诱导跨膜蛋白抗体(源性蛋白2)
溴化镍 99%马血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)免疫试剂盒FBXL3蛋白抗体Microsporidia protien 蜜蜂微孢子虫蛋白抗体
化镍,六水 AR,98%马血纤蛋白原(Fbg)免疫试剂盒F-box蛋白相关蛋白11抗体Microcephalin 1/BRIT1 小脑症因1/认知相关蛋白抗体
三氧化二钴 CP,98.5%马血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒FGFR1癌因伴侣蛋白2抗体MICB MHC I类链相关蛋白B
三氧化二钴 AR,99.0%马血管内皮生长因子(VEGF)免疫试剂盒成纤维生长因子受体底物2抗体MICA/MHC I MHC I类链相关蛋白A/组织相容性复合物1抗体
氨磺钴 98.5%马血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒FNBP1L蛋白抗体MIC1/C18orf8 结肠癌相关蛋白MIC1抗体
乙钴,四水 AR,99.5%马C(VC)免疫试剂盒GATA结合蛋白2伴侣蛋白抗体MIA2 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗体
乙钴,四水 ACS马A(VA)免疫试剂盒CD349抗体MHC Class II/MRC OX-6 组织相容性复合体2抗体